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主题：【原创】对LC的认识（2）

浏览0 回复32 电梯直达
xue2009
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发表于：2010/10/03 11:41:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
    作为LC的 版主，我有责任跟大家分享一些我对LC这方面的理解，范围比较广和杂，加上本人水平有限，望大家多多包涵。
    今天我想说的是关于标准曲线和工作曲线的问题，通俗的说，标准曲线就是不考虑样品基质效应，而直接用纯标准品配置不同浓度而得到的一条线性回归曲线，这对于一些基质简单的样品是完全可以的。但如果样品的基质比较复杂时，你仍然按照这种方法做，那么误差会相当大，并且加标回收率会相当低。这时我们就要考虑用工作曲线了，简单的说：工作曲线就是带基质效应的标准曲线，因为这种情况下的样品往往需要经过一系列的前处理，所以我们往标准品中加样品的基质，再将配置好一系列浓度的标准品和样品按照相同的前处理步骤处理后，再经LC测定便得到了工作曲线，这就是带基质效应的标准曲线，用它来测定实际样品的浓度会比较准确，可信；并且也能得到较高的加标回收率，希望大家在做实验时不要忽视这一点。
    有人说做工作曲线的步骤跟测加标回收率的步骤是一样的，实际上它们仍有些不同。加标回收率分为实际样品的加标回收率和方法的加标回收率，这两者的区别就是一个本身含有目标组分而另个本身不含有目标组分；如果样品含有目标组分，要确定它的浓度，可以用工作曲线测定（外标法），也可以用标准加入法。
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2010/10/3 11:49:33 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你好，请教下啊。
那个工作曲线是指用加了样品中的基质后的标样配成的不同浓度溶液所得的曲线？
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阿宝
lpr20
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2010/10/3 11:52:06 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主是否可以讲一下工作曲线过零点与否的却别？我外标法的曲线多数都不过零点，这个应该也是正常的吧？
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xue2009
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2010/10/3 11:54:06 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yukepotato(yukepotato) 发表:
你好，请教下啊。
那个工作曲线是指用加了样品中的基质后的标样配成的不同浓度溶液所得的曲线？

对，就是这个意思，不过要保证所加基质中不能含有目标组分，否者就不叫工作曲线（外标法），而叫标准加入法了。
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xue2009
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2010/10/3 11:58:59 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 阿宝(lpr20) 发表:
楼主是否可以讲一下工作曲线过零点与否的却别？我外标法的曲线多数都不过零点，这个应该也是正常的吧？

不过零是很正常的，因为有背景吸收。外标法得到的曲线判断好坏有两点，一是截距，截距越小越好，越小说明背景干扰越小；二是斜率，斜率越大越好，越大说明越灵敏，即较小的浓度就可以获得较大的响应信号。
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2010/10/3 19:26:54 Last edit by xue2009
〓猪哥哥〓
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2010/10/3 19:26:34 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
恭喜恭喜啊，今天我才知道液相多了一位版主。欢迎欢迎！

版主一上来就热心回帖，分享经验，有很强的责任心和热情心，希望新版主一如既往保持，把版面建设的更好！
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〓猪哥哥〓
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2010/10/3 19:32:37 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果样品的基质和前处理样品所用的是一样，那么还有必要用工作曲线法吗？
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xue2009
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2010/10/3 19:37:35 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
如果样品的基质和前处理样品所用的是一样，那么还有必要用工作曲线法吗？

有必要，因为需要保证标准品和样品在同一条件、同一体系下，这样得到的结果会更准确。
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老多_小多
emoc98311
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2010/10/3 22:51:44 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对LC的认识（2）?

(1)呢？
发布了还是我没看到？
可以考虑整合在一起做原创大赛的作品嘛
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无为
taodali
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2010/10/4 21:08:52 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为什么很多标准中关于定量用的都是标准曲线而不是工作曲线，我有点糊涂了，请帮忙分析一下，谢谢！
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xue2009
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2010/10/4 21:23:02 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 无为(taodali) 发表:
为什么很多标准中关于定量用的都是标准曲线而不是工作曲线，我有点糊涂了，请帮忙分析一下，谢谢！

如果对于基质简单的样品，测其中的某种目标物当然可以用标准曲线，但如果基质很复杂的话，直接拿标样做标准曲线会造成很大的误差。举个例子，测鸡蛋中三聚氰胺的含量，因为基质比较复杂，所以必须向不含三聚氰胺的鸡蛋基质中加入三聚氰胺，并按照和待测样品相同的前处理步骤处理后测定，这样定量的结果才会准确。
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