主题：【第三届原创参赛】解决液相色谱峰拖尾小实例

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liuliuhui

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发表于：2010/10/30 16:14:52 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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概述：

灯盏细辛，习称灯盏花，为菊科植物短葶飞蓬[Erigeron breviscapus(Vant.)Hand-Mazz]的干燥全草，主要分布
在云南、广西等地。行温、味辛、微苦，具有散寒解表、祛风除湿、温络止痛之功效。小儿脓耳，捣汁滴入耳内；左
瘫右痪，风湿疼痛，水煎点水酒服。临床上主要用于缺血性心脑血管病的治疗，对冠心病、高粘滞血症也有一定疗效。临床所使用的制剂有口服和静脉滴注两类，收载于《中华人民共和国药典》（1977年版一部）。近年来对其化学
成分、药理学研究及临床应用都进行了深入研究。
由于本人需检测灯盏花素中灯盏乙素的含量，因此对样品进行了初步的液相分析。

结构：

灯盏花素（breviscapine）是从灯盏细辛中提取的黄酮类有效成分，主要含有灯盏乙素和少量的灯盏甲素。结构
如下：

由以上结构可以看出，灯盏乙素和甲素中都含有一个葡萄糖醛酸的结构基团。下面主要是灯盏乙素的液相色谱图
普通液相色谱条件如下:
色谱柱：YMC C18（250×4.6mm，5μm）检测波长：335nm
柱温： 30℃ 流速：0.8mL/min
流动相：甲醇/水=45% 进样量：15μL

如图可见，色谱峰存在严重拖尾现象，这就是由于灯盏乙素中含有一个羧基，硅胶对酸性化合物的吸附，在洗脱过程
中使酸性物质不能同时到达检测器，造成峰展宽。在普通的液相条件下峰型很难看，因此将色谱条件改为:
色谱柱：YMC C18（250×4.6mm，5μm）检测波长：335nm
柱温：30℃ 流速：0.8mL/min
流动相：甲醇/水=45% (AcOH:5‰) 进样量：10μL

加入乙酸后，峰型明显得到改善。（注：加入磷酸的效果也很好，但出于对柱子的维护方面考虑加入乙酸）

讨论：

1．色谱峰拖尾原因：

A：硅胶对酸性化合物的吸附引起的拖尾；

B：进样量太大造成超载现象容易引起拖尾；

C：样品溶剂较流动相的极性大容易造成拖尾现象。

2．解决方案：

A：硅胶对酸性化合物的吸附引起的拖尾

硅胶对酸性化合物的吸附，在洗脱过程中使酸性物质不能同时到达检测器，造成峰展宽。灯盏乙素，为酸性化合

物，普通液相条件下严重拖尾，加入酸后，首先与硅胶表面的酸性硅醇基反应，抑制了灯盏乙素与硅醇基的反应，达

到调节峰型的目的。

B：进样量太大造成超载现象引起的拖尾

当进样量过大时导致拖尾可减少进样量。

C：样品溶剂的极性较流动相的极性大

如果是此原因引起的拖尾现象可将样品用流动相溶解。