主题:【求助】安捷伦四元泵基线波动严重

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青橙
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Agilent1200,用乙腈和磷酸盐缓冲液为流动相,检测波长260nm,各使用一个通道时,基线波动严重0.5mAU;先将流动相按比例混合后使用一个通道,则基线波动只有0.01mAU。基线波动太严重,以至于我的实验不能开展。几个月前使用两个通道,相同的条件,并未出现此情况,基线波动也在0.01mAU。我觉得应该是混合不匀造成的,但是仪器具体哪个部件出问题了呢?是比例阀吗?另外,室温的影响或者是磷酸盐缓冲液不干净、吸收太大,也可能是基线波动太大的原因。但以前同样温度低,使用一样的试剂配溶液,并未出现这种情况,所以我觉得可能性不大。之前比例阀出过漏液的问题,我修理过。在此,请教各位,这种情况是怎么回事呢?万分感谢!
推荐答案:wdl158160回复于2010/12/22
很有可能是运行过程中产生气泡造成的,形成最有气泡的原因可能有:
1.脱气机可能有问题了,不脱气以致两相混合时产生了气泡,使基线不稳。
2.比例阀可能又出问题了,两相比例失调,产生气泡。
你可以看看从比例阀出来的管跑里有没有气泡产生,来判断是不是气泡造成的基线波动大
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wdl158160
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很有可能是运行过程中产生气泡造成的,形成最有气泡的原因可能有:
1.脱气机可能有问题了,不脱气以致两相混合时产生了气泡,使基线不稳。
2.比例阀可能又出问题了,两相比例失调,产生气泡。
你可以看看从比例阀出来的管跑里有没有气泡产生,来判断是不是气泡造成的基线波动大
有水有渝
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如果不走梯度的话,可以手动混合好后用单通道试试
〓猪哥哥〓
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我们实验室暑假就正好也出现了这个问题。
最后发现是气泡的问题。其实流动相都超时了点。但是混合后还是产生小气泡。不知道你们有没有配脱气机,我们是高压混合,但最后还是配了一个脱气机,成本很高
yinzongyuan123
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原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
我们实验室暑假就正好也出现了这个问题。
最后发现是气泡的问题。其实流动相都超时了点。但是混合后还是产生小气泡。不知道你们有没有配脱气机,我们是高压混合,但最后还是配了一个脱气机,成本很高


Agilent1200是先脱气后混合,我们的仪器是这样的,所以脱气后混合出现气泡是很有可能的啊!
redrumcha
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我们也遇见过这种情况,建议不要拿纯的有机相和缓冲盐通过梯度混合,可以互相兑兑再混合,或者是先混成一体再做。两项的性质相差越大,混合后的噪声就越大。一般甲醇/水体系混混还行,换成乙腈就很容易出问题。我想应该是两相间的互溶性不太好引起的吧,而且现在气温低,溶解的就更差了。我们也是时好时坏,最后凡是这种都是先混好再进液相
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2010/12/23 8:47:03 Last edit by redrumcha
llscmary999
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小不董
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可以尝试下:先混合再用一个通道走流动相,如果还在摸索方法,就算了。
将乙腈和缓冲盐再超声等方法驱赶气泡,可能有一定的效果。
调节比率阀,并打开purge阀,观察是否有很多气泡,待气泡消失后,关闭排气阀,走基线。还有控制温度,温差大了,也容易有气泡,或基线不稳。
〓猪哥哥〓
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原文由 yinzongyuan123(yinzongyuan123) 发表:
原文由 〓猪哥哥〓(03yx2) 发表:
我们实验室暑假就正好也出现了这个问题。
最后发现是气泡的问题。其实流动相都超时了点。但是混合后还是产生小气泡。不知道你们有没有配脱气机,我们是高压混合,但最后还是配了一个脱气机,成本很高


Agilent1200是先脱气后混合,我们的仪器是这样的,所以脱气后混合出现气泡是很有可能的啊!

低压出现这个情况还可以说的过去,但是我们在没有脱气机情况下,高压泵后混合也出现了气泡。压力波动有2-3bar
〓猪哥哥〓
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原文由 redrumcha(redrumcha) 发表:
我们也遇见过这种情况,建议不要拿纯的有机相和缓冲盐通过梯度混合,可以互相兑兑再混合,或者是先混成一体再做。两项的性质相差越大,混合后的噪声就越大。一般甲醇/水体系混混还行,换成乙腈就很容易出问题。我想应该是两相间的互溶性不太好引起的吧,而且现在气温低,溶解的就更差了。我们也是时好时坏,最后凡是这种都是先混好再进液相

暑假在脱气机未到之前,都是混合好,采用单一通道走,基线就没有出现过问题
小懒猪
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我们以前也遇到过这种问题,换了一个比例阈就好了
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