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产品销售出去,一般来说就有售后的服务;作为我们提供色谱耗材的公司,比较麻烦的事情是:这个产品是没有定量标准的,尽管在定性上没有问题,忙活了好几天,重复出了产品COA的结果,但碰到客户坚持认为产品有问题,就比较纠结,下面是典型的例子。这是一个SIGMA的卵磷酯(P7443-100MG)试剂,客户买过去当做标准品用的,定量是用TLC薄层色谱来定量的,证书如下:接到客户投诉,客户的疑问:最近做实验结果出来的峰型很差,而且有效期sigma保证冷冻产品有1年,但这2个产品的批号下载的COA证书上显示是2011.1月,客户怀疑产品已经变质。第一时间联系供应商,供应商回复:1、该产品是没有明确效期的,我们公司对这类产品的承诺是,按照规定的条件储存,并且未开封的条件下,一年内有效。所以客户对于生产日期的顾虑是不必要的。2、附件是该产品质检的TLC方法。建议客户按照该方法复测一下,判断产品含量是否下降;3、我们没有用HPLC检测过这个产品,因此没法提供色谱条件和参考谱图。但是他们有GC的色谱条件,方法是先将标准品L-α-磷脂酰胆碱皂化然后采用三氟化硼甲醇溶液甲酯化,如果产品没有问题,谱图上标示的5个峰都可以检测到的,第一个峰应该是溶剂的,如果客户实验条件允许,可以用这个方法复测一下。把供应商的回复和客户沟通让客户用非HPLC方法(来按照sigma提供的GC或者TLC方法)来检查一下,客户坚持不检测,我们先让客户寄回来我们在实验室复查一下,纠结。为了验证产品是否有问题,负责试剂的产品专员商量下来决定用客户的HPLC方法和供应商提供的GC方法两种途径来验证产品。一、液相方法1、流动相:异丙醇:正已烷:水=70:16:14
2、仪器条件:
色谱柱: CNW Athena Silica,250mm*4.6mm*5um(LAEQ-462576)
柱温:40℃ 紫外检测器波长:205 nm
流速:1.0ml/min 柱压:14.4MPa
3、 样品前处理:
精确称取2mg卵磷脂标品,置于10ml容量瓶,加流动相溶解定容至刻度,摇匀,即得对照品溶液。
客户认为是正常的标准品的谱图
客户认为不正常的同时做的标准品谱图(疑问,溶剂峰的响应差别非常大)
客户寄回来的试剂配好溶液以后进样,20.295出峰应该是卵磷脂,纯度很好,硅胶柱由于平衡时间比较短,所以基线有些飘。
二、GC实验条件
仪器:岛津GC-14B
检测器:FID
毛细管柱:CNW,CD-2560,100m*0.25m*0.2μm
载气:氮气 1.4Kg/cm2
进样温度:220℃
实验温度:220℃
检测器温度:220℃
供应商提供的卵磷脂甲酯化以后的标准谱图,采用2380的GC柱子,30*0.25*0.25,第一个是溶剂峰
由于实验室没有2380的柱子,同样做脂肪酸甲酯,采用了实验室有的样柱:CD-2560,100M*0.25MM*0.25um的柱子,因为柱长度是100米,因此出峰时间后延比较多,但5个脂肪酸甲酯的峰还是比较明显,而且和供应商提供验证方法上的谱图接近。
三、判断和结论
P7443-100MG这瓶试剂,从现有的实验数据来判断,产品没有质量问题。但由于缺乏对照品,所以没有办法对其含量做进一步确认。