主题：【第六届原创】我对加标回收实验的一点理解

在日常的检测工作中，我们总是会用到各种质控手段来保证检测数据的质量。加标回收率实验就是我们常用的一个质控手段，下面我把我对加标回收率实验的一些认识分享给大家，希望各位专家网友批评指正。

一、加标回收率实验的目的

一般做加标回收率实验主要有两个目的。一，验证样品的前处理过程是否对样品的测定产生影响，例如样品萃取是否完全、消解是否完全、样品转移过程是否损失等等；二，验证测量过程中是否有基体干扰。因为如果简单测定标准物质，根本无法确定基体的干扰情况，因为绝大多数的标准样品都没有复杂基体（基本都是水溶液）。而进行加标回收率实验，就是把单纯的待测物质加入到实际的样品中进行测定，完全是在真实样品的基体条件下完成的测量，所以能够真实反映基体的情况。

二、加标回收率实验操作注意事项

我举例说明几个加标回收率实验的注意事项。

例1：某水样总磷含量为2mg/L，用钼锑抗分光光度法进行检测，如何做加标回收率实验？

方法1：分别取2ml样品两份进行消解，消解后定容到50ml，在其中一份中加入1ml 100mg/L的标液，分别测定结果，然后进行计算。

问题：1、应该使样品+标样同时进行消解，才能够有效的评价消解过程对检测的影响。

      2、定容后加入加入标液会造成体积的变化，影响测量结果。

方法2：分别取2ml该样品两份，一份样品中加入1ml 浓度为5mg/L的标样，两份样品同时消解，消解后定容到50ml，显色、测定、计算。

【结论】1、样品与加入标液同时消解测定，实现过程同步。

        2、没有发生体积变化，不会对最终结果产生影响。

方法3：取1ml 100mg/L的标准样品放在100ml容量瓶中，用待测水样定容到100ml。然后分别取一份水样和一份上面混合样品进行消解，测定。

【结论】推荐使用该方法，因为该方法最大限度使加标样品和水样基体一致。在该方法中使用待测水样定容到100ml，加入样品的标准溶液对水样的稀释作用只影响1%，几乎可以忽略。与方法2相比有以下优点：1便于质控考核。可以由考核人员提前配制好加标样品，以盲样的形式发给被考核人员，而不是由被考核人员自己配制。2加标实验与正常的检测步骤，完全相同（方法2中要先取2ml样品，再加入1ml标液，实际参与的消解体积比正常检测时多1ml）。

三、加标回收率计算的注意事项

加标回收率计算公式：


例2：有一水样总磷含量为3.7mg/L,加标量50mg/L，测定结果为51.2mg/L。计算加标回收率？



【结论】从计算结果看，加标回收率95.4%很不错。但从另一方面计算51.2-50=1.2，也就是说加标后，测定的样品中TP 的含量只有1.2，比3.7小了68%。说明加标后测定结果很不好。原因是什么呢？

加标量过大，一般要求加标量为样品含量的0.5倍到3倍，（不同文献表述不同）同时要保证加标后的样品含量在工作曲线范围内。

例3：水样中COD含量为 20mg/L，如何做加标回收率实验。

解：取1000mg/L标样1ml，用待测水样定容到100ml。测定结果为29mg/L,则回收率为



【结论】这个实验比较合理。
【注】回收率结果不受体积影响的几种情况

（1）  当加标体积远小于试样体积时, 可不考虑加标体积的影响.

例：比如采用4-氨基安替比林萃取光度法分析水中的挥发酚, 加标体积若为1.0 mL , 而取样体积为250 mL 时, 加标体积引起的误差可以忽略不计。

（2）  最终需要定容测量的项目无论加标体积是多少，最终定容体积都相同，所以不存在加标后样品被稀释的影响

还有一种情况，要使用加标的总量（不是浓度）进行计算。

我们测定的所有结果，在除以取样体积之前都是物质总量，而不是浓度。比如分光法测总磷，曲线横坐标代表的是50ml比色管中含有磷的总量是多少μg。所以，我们如果用总量来计算加标回收率时就可以不考虑因为加标引起的体积变化问题。对于固体样品的测定，或者是标样浓度不是远高于样品浓度的情况下非常适用。

例4：水样COD含量为50mg/L.做加标回收率。

解：按照上面的方法不行，因为不计算体积误差会比较大。所以用总量（C*V)计算.

取500mg/L标样10ml，用水样定容到100ml，测定结果为98mg/L.


【注意】这个方法有在上面讲过，有不足之处，因为样品的基体被稀释了，在万不得已的情况下勉强使用。比如说标准溶液的浓度和样品中待测量浓度接近，找不到更高浓度饿标准溶液时。
例5：对某污泥中总铬进行加标回收率实验。

方法：1.消解时一般取污泥样品mg，样品中总铬含量为cμg/g, 则消解液中总铬的量为c*m。

2.确定加标量为5μg，即取5mg/L标准溶液1ml。

3.分别取六份样品，每份0.2g左右，其中三份直接消解，另三份中分别加1ml标样后消解。

4.消解后定容到25ml。

计算方法：

1.三份样品测的结果平均值为26.2μg/g。

2.三份加标后样品溶液测定结果为0.43μg/ml，0.44μg/ml，0.46μg/ml。

3.加标回收三份样品的质量分别是0.2122g，0.1969g，0.2015g。
以第一份样品加标回收率计算为例，第一份样品取样质量是0.2122g，测得污泥样品的含量为26.2μg/g.加标后消解液测定浓度为0.43ug/ml，消解液体积为25ml。


【结论】1.该方法为了保证准确，做了平行样品，取平均值计算；

        2.对于固体样品做加标回收率，除非每份样品的取样量都相同（很难达到），一般都采用总量的方式进行计算。

        3.该方法中将液体的标样加入到固体样品中后进行消解，如果使用固体的标准样品，计算方法相似，但是应考虑消解时条件的改变（消解时间延长，酸使用量增加等）。
四、加标回收率100%就能说明检测没有问题吗？

例6：测定COD时，氯离子对COD有干扰，如果不屏蔽，会使COD值增加。假设某水样中氯离子含量能使COD增加a mg/L,水样中实际COD值为b mg/L,测定该水样的结果是（a+b）mg/L。在水样中加标c mg/L，则测定结果为（a+b+c）mg/L,计算加标回收率



【结论】1.虽然加标回收率是100%，但是明显检测结果不正确，所以加标回收率好，不明证明检测结果就一定好。

2.对于待测样品中含有某种干扰物质，该物质能够定量的引起一定的干扰，而在检测中未被发现或未采取有效屏蔽措施时，通过加标回收率不能验证检测结果的正确与否。（此种干扰类似于检测中的系统误差）

3.另外，当样品消解、蒸馏等处理未能使待测物质完全达到预期的处理目的，而加入的标样又是可以不经前处理即可以测量的时候，加标回收率的结果不能验证实际样品的检测结果。（如例5中，消解土壤样品如果不加入HF，测定结果会偏低，但是加标结果可能会很好）
五、总结

1、做加标回收率实验时，一定要将标样加到样品中同时消解。

2、加标量要严格控制在样品浓度的0.5~3倍，要确保加标后样品浓度仍然在工作曲线范围之内。

3、注意加标后体积变化对样品浓度的影响。有三种情况不用考虑体积问题。

a.样品测定前经过浓缩、蒸馏等处理，测定前样品溶液体积是一个固定值

b.样品溶液有预留体积的，比如TP、TN、氨氮等，测定前需要定容到一定体积。

c.与样品体积相比，加标体积量极小，可以忽略体积影响。如，在250ml样品溶液中加入1ml标样（体积影响0.4%）。（该情况要求标样浓度高于样品浓度至少50倍）

4、用总量方法计算加标回收率。适用于固体样品、标样浓度与样品浓度相差不大的情况。

5、加标回收率结果一般认为在90%~110%较好，不同检测项目要求不同。如果回收率过低，要检查操作过程中是否有损失，样品基体是否存在负干扰；若过高，要检查在操作过程中是否引入了污染，样品基体是否存在正干扰。

6、加标回收率是100%不能说明测定结果没有问题。