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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】毛细管电泳分析DNA

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wy20071722
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发表于：2014/04/18 22:41:53 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
求教：我用毛细管电泳跑DNA，为什么随着时间的增加，DNA的响应却越来越小，重新冲洗毛细管没有用，做药物样品就不会这样。DNA怎么处理才能保证信号变化不会这么快？
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2014/4/19 2:18:41 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你用的是涂层毛细管么？如果不是，那么存在吸附效应的。。。
该帖子作者被版主 nini2006加 3积分， 2经验，加分理由：应助
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nini2006
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2014/4/19 19:37:22 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查
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wy20071722
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2014/4/20 13:19:28 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查


换过毛细管了，没有改善。样品是新买的。
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2014/4/20 13:20:43 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 CEcret(v2812644) 发表:

你用的是涂层毛细管么？如果不是，那么存在吸附效应的。。。


我用的是裸管，刚刚溶解的DNA相应很高，放一段时间就不行了。换了新管子也不行。
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CEcret
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2014/4/22 3:05:44 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 CEcret(v2812644) 发表:

你用的是涂层毛细管么？如果不是，那么存在吸附效应的。。。


我用的是裸管，刚刚溶解的DNA相应很高，放一段时间就不行了。换了新管子也不行。


这个正是吸附作用明显的表现。尝试采用：

1. 涂层毛细管

2. 动态涂层技术

3. 极端pH，例如pH>9。
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2014/4/22 11:52:47 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查


换过毛细管了，没有改善。样品是新买的。
外部条件有变？温度、湿度等……
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2014/4/22 15:30:17 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
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管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查


换过毛细管了，没有改善。样品是新买的。
外部条件有变？温度、湿度等……


这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。
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2014/4/23 1:07:28 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
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原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查


换过毛细管了，没有改善。样品是新买的。
外部条件有变？温度、湿度等……


这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。


DNA样品，只要保持样品盘控温，稳定性还是可以满足分析要求的。个人认为最重要的因素在于你采用的非涂层裸管的吸附。
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2014/4/25 21:33:17 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查


换过毛细管了，没有改善。样品是新买的。
外部条件有变？温度、湿度等……


这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。


DNA样品，只要保持样品盘控温，稳定性还是可以满足分析要求的。个人认为最重要的因素在于你采用的非涂层裸管的吸附。


我特别不明白的是DNA不是带负电吗，管壁也带负电，为什么还有吸附？这不是和极端pH的道理一样吗？

我家仪器没有控温装备
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2014/4/26 12:33:18 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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管的问题，样品问题，条件稳定度的问题，要逐一排查


换过毛细管了，没有改善。样品是新买的。
外部条件有变？温度、湿度等……


这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。


DNA样品，只要保持样品盘控温，稳定性还是可以满足分析要求的。个人认为最重要的因素在于你采用的非涂层裸管的吸附。


我特别不明白的是DNA不是带负电吗，管壁也带负电，为什么还有吸附？这不是和极端pH的道理一样吗？

我家仪器没有控温装备
咦——你不是用的beckman的仪器吗？实在不行，保持空调常开，门窗紧闭，以控制温湿度。晚上停止实验的时候也不要关。
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