检测成功关键,固相萃取富集高效液相检测法
莠去津是一种广谱除草剂,可预防和除杀一年生禾本科杂草和阔叶杂草,对某些多年生杂草也有一定的抑制作用,在我国很多地区都有较多使用,尤其是在玉米、甘蔗产地用量更大。但该物却是一种潜在致癌和内分泌干扰物,目前已被列为国际环境优先控制污染物。
由于莠去津的大量使用,导致我国及国标某些地区的粮食中含有微量的该物质残留,该地区的土壤和水质也有不同程度的污染,严重的危害这我们的幸福生活和身体健康。
为了预防和控制这种污染,检测是很重要的一个环节。下面我们就着重介绍下高效液相色谱法检测饮用水中莠去津含量。
实验部分
原理
取适量饮用水水样萃取、浓缩,再固相萃取富集浓缩、定容、滤过,由进样系统进样,色谱柱分离,紫外检测器检测,保留时间定性,峰面积定量计算。
仪器
液相色谱仪(等度+紫外检测器+柱温箱),氮吹装置,溶剂过滤器,超声波振动仪,KD浓缩器,固相浓缩装置及SPE柱(硅酸镁净化柱)
试剂
石油醚、乙醚、甲醇(色谱纯)、二氯甲烷、无水硫酸钠、氯化钠、高纯氮气、正己烷
样品制备
标准品制备:准确称取0.01g莠去津标准样品,用少量二氯甲烷溶解后,再用甲醇准确定容至100ml,该溶液为100μg/ml储备溶液,备用。
样品前处理:分两步走。
第一步样品预处理:准确量取100ml水样于250ml分液漏斗中,加入5g氯化钠,待氯化钠完全溶解后加入10ml二氯甲烷萃取1min,注意及时放气,静置分层后,转移出上层有机相,再加入10ml二氯甲烷萃取,分层,合并有机相,有机相经过无水硫酸钠脱水后转入浓缩瓶中。用KD浓缩器将萃取液浓缩至近干,取下浓缩瓶,备用。
第二步固相萃取富集(采用SPE柱净化):将浓缩至干的样品用10mL正己烷溶解;用适量石油醚预淋洗净化柱,弃去淋洗液。当硫酸钠刚好露出,将样品萃取液加入净化柱中,随即用20mL石油醚冲洗。将洗脱流量调至5mL/min,再用20mL的乙醚-石油醚(1+1)洗脱液洗脱;将洗脱液用KD浓缩器浓缩至近干后,用氮气刚好吹干,最后用甲醇定容至1mL,过0.45μm滤膜过滤,待测。
色谱条件
检测器:紫外检测器
色谱柱:C18,(5μm,4.6×250mm)色谱柱
波长:254nm
流动相:甲醇:水=:80:20(V:V)
流量:1.0mL/min
柱温:40℃
进样量:10μL
标准品色谱图:
某水样样品色谱图:
通过以上色谱图我们不难看出,该方法检测饮用水中莠去津准确、可靠、效果好。
该方法成功的关键在于样品前处理固相萃取富集过程,固相萃取有效的去除了目标物的干扰物,保证了检测结果的准确、可靠性;富集使样品浓缩程度更高,这样就大大的提高了方法检出限,是检测成功的另一关键因素。