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甘草中甘草苷快速检测 甘草为豆科多年生草本植物,具有清热解毒、止咳祛痰、补脾和胃、调和诸药的功效。可用于治疗脾虚便泄、胃虚口干、肺虚咳嗽、胃肠溃疡、咽喉肿痛等多种疼痛等。是我们常见的药物,效果不错而且便宜(就是味道有些怪,有些人不习惯)。 甘草物美价廉,是大众产品,质量得有保证,检测很有必要。甘草中药用成分主要有甘草苷、甘草酸、甘草酸铵等,下面我们就介绍下高效液相色谱法检测甘草中甘草苷含量。实验部分原理取适量该粉末样品加20%乙腈溶解,超声提取后,经进样器进入高效液相色谱系统,C18色谱柱分离,紫外检测器检测,保留时间定性,峰面积定量计算(外标法)。仪器及试剂 仪器:高效液相色谱仪(紫外检测器+等度泵+柱温箱),电子天平,溶剂过滤器,超声波清洗器,三号筛(药典筛),具塞锥形瓶,针筒式过滤器等。 试剂:乙腈(色谱纯),冰醋酸,超纯水样品配制 对照品溶液配制:准确称取甘草苷对照品0.15mg于25ml容量瓶中,加20%乙腈溶液配制成60μg/ml对照品溶液,备用。 供试品溶液配制:取适量干燥本品粉碎,过三号筛后准确称取5g置于具塞锥形瓶中,精密加入20%乙腈溶液50ml,称定重量,超声处理20min,放冷,再次称定重量,用20%乙腈溶液补足减少的重量,摇匀,0.45um微膜滤过,待测。色谱条件
检测器:紫外检测器
色谱柱:VenusilXBPC18(L)(250×46mm,5μm)色谱柱
检测波长:276 nm
流动相:乙腈:0.5%冰醋酸=2:8(V:V)
流速:1.0 mL/min
柱温:30℃
进样量:10μl
对照品色谱图:
甘草样品色谱图:
这个样品检测较简单,效果一般也都不错。值得注意的是这个方法中有三个地方需要注意,一是前处过程理中超声处理时间尽量长一些,以避免样品不能完全被提取;二是流动相选择,参考方法中有很多种流动相的选择方式,有选乙腈:0.5%冰醋酸=1:9(V:V)的,有选乙腈:0.5%冰醋酸=2:8(V:V)的,有选乙腈:0.5%冰醋酸=3:7(V:V)的,也有的也是这些比例,但用甲醇代替了乙腈,我们这也尝试过几种方式,最后还是觉得乙腈:0.5%冰醋酸=2:8(V:V)这个更理想些,既避免了分离度差的影响和检测时间长的困惑;三是色谱柱的选择,尽量选择耐酸性强一点的色谱柱,VenusilXBPC18(L)(250×46mm,5μm)色谱柱或是Venusil ABS C18(250×46mm,5μm)色谱柱就不错。
就到此吧,非常感谢大家能认真阅读,希望多提意见,谢谢啦!