还好我先单独试了铵根离子,否则5种标样离子混合在一起,对于我这种经验不太丰富的人来说可能要折腾一下子了。
图1
图2
话说距离上次使用CS17柱子已经过了大半年了,这一次我又遇到了一个样品,测定样品溶液中乙醇胺的含量,基于这也是有机胺类,和之前甲胺类类似,我又选择了CS17这根柱子,又选择了相同的色谱条件,这次标样没有出现问题,问题出现在样品上,首先我直接将样品溶液稀释了250倍进样,出现图3谱图,出现这样的谱图,我第一个感觉是可能是样品基体较复杂,当然浓度肯定还是过大,所以我继续在此基础上进行稀释,出现图4谱图,看样子好像比之前好,但是我还是无法确定问题到底出在哪里。
我只能去求助老师了,老师在看过谱图后,立马让我去测试稀释后样品溶液的pH值,果然不出老师所料,溶液呈碱性,所以我又大意了,又犯了同一个错误,上一次可以说是没有经验,但是这一次没有什么借口了。最后我将溶液以流动相来稀释,结果见谱图5。
图3
图4
图5
总结一下:造成峰变形的原因是,样品的pH太高,呈碱性,而流动相为酸性,虽然样品进样量不大,但当碱性很大时,直接进样,短时间中和了淋洗液,破坏了平衡,等再平衡,被测离子出峰延后,峰型不正,不熟悉的人还以为样品有问题。由于CS17的淋洗液酸度较低,不像CS16(40mM MSA)有较强的抗碱能力,对样品的pH有严格的要求。
如果,样品太酸会怎么样,虽然我没遇到过,但也肯定会短时间破坏淋洗液平衡,推测造成峰前伸,出峰提前。老师是这样说了,我想老师应该遇到过这种情况。
俗话说,事不过三,希望下一次在用CS17检测样品的时候不会再犯这一个错误,以后遇到问题的时候可以考虑的更全面,做事情更加认真,当然也希望看过这篇文章的同学不要步我的后尘,可以顺利做实验。