主题：【第十一届原创】菜鸟与液相色谱仪之糗事（1）

菜鸟与液相色谱仪之糗事（1）

        我们单位的LC1260液相色谱装机近一年了，因种种原因到现在还没有开过机，安装工程师现场培训的内容也忘的不剩下什么了。近期准备参加厂家的仪器培训，培训前想提前了解一下仪器，听课时好有针对性的去学习。想着仪器都是相通的，把仪器培训教材看上两遍，应该问题就不大了吧。理想是丰满的，现实是骨感的。现把我在学习液相过程中的各种糗事分享给大家。
        把培训教材看了两遍后满怀信心的开启了我的液相工作模式。
        配标准溶液，标准曲线的五个点应该怎么确定呢？没关系，我们有万能的“仪器论坛”，论坛上高手如云。先搜索有关配标的贴子，真的找到了，感谢“我是风儿”的认真回答。

图1:论坛查询

        为节约成本，本次练习只配制了一种标准溶液---灭多威。先将100 ug/ml的标准溶液用甲醇溶液稀释成10 ug/ml，再稀释成1 ug/ml。按顺序分别吸取500 ul、600 ul、700 ul、800 ul、900 ul甲醇溶液于五个1.5ml进样瓶内，再分别吸取500 ul、400 ul、300 ul、200 ul、100 ul灭多威标液（1 ug/ml）按顺序加于上述五个1.5ml进样瓶内，配制出浓度分别为0.5 ug/ml、0.4ug/ml、0.3 ug/ml、0.2 ug/ml、0.1 ug/ml标准溶液。

图2：配制标准溶液

        打开电脑，开启工作站：选择“1260II-FLD”，点击“启动”打开在线工作站。打开液相各个模块，换好流动相，准备排气。（每次换上新的流动相、开机前、关机前都需要排气清洗）反时针旋开泵模块上的溶液排空阀，右键单击二元泵视图空白处，选择 “方法”，设置流速为5 mL/min，A溶剂为100%,B溶剂为0%→应用→点开二元泵上的绿色开泵按钮→3-4分钟结束。右键单击二元泵视图空白处，选择“方法”，设置流速为5 mL/min，A溶剂为0%,B溶剂为100%→应用→点确定→3-4分钟结束。
        一切顺利，信心大增。下一步，编辑方法。点左下角，“方法和运行控制” →点菜单栏上“方法” →点“编辑完整方法”，选择所有选项，点击“确定”→方法注释不用写，点击“确定”→选择进样源，点“确定”。依次按标准要求设置“二元泵”、“样品器”、“柱温箱”，点“确定”出现了下面界面：

图3：问题出现

        这不是应该在数据分析时编辑吗？哪里出了问题？带着问题重新编辑方法，发现点“编辑完整方法”后， 不应该勾选“数据分析”选项：

图4：问题解决

        编辑序列：点左下角“方法与运行控制”，点 “序列”→点“序列参数”开始设置 “路径”、“子目录”，“命名模式”。再点“序列”→点“序列表”，依次设置“样品容器位置”、“样品位置”、“样品名称”、“进样源”、“进样量”、“进样次数”→点确定。点“序列”，点“序列模板另存为”，起个名字，确定。
        运行方法：点左下角“方法与运行控制”，选择刚才所建的方法，点 “序列” →点“序列表” →点“应用”。开始进样，这个时候心情是愉悦的。一个小时后来查看进样情况，发现序列表还在进第一个样品甲醇。

图5：问题

        为什么不进样？向兄弟单位的一个液相工程师询问得到如下答案：

图6：找到答案

        修改方法，重新进样，样品终于出峰了。
        菜鸟开液相先告一段落，下一步继续菜鸟在数据分析中的糗事。