主题:【已应助】HPLC中离子对试剂的选择

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你一见我就笑2169
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最近在学习离子对试剂作为流动相的相关知识,有几个问题想请教一下:
1、酸性化合物,需调节pH至较高;碱性化合物,需调节pH至较低,这样有利于化合物的充分解离,之后与离子对试剂结合,形成离子对。请教:这样理解是否准确?
2、有资料显示:离子对试剂一般不单独使用,而是与磷酸盐共同使用。请教:这是什么原因?有什么好处?两者共用时,各自一般使用多大的浓度?
3、有网友提到:离子对试剂要慎用,对色谱柱的损害是不可逆的。请教:这是为何?
4、离子对试剂也是种类繁多,我们如何选择?类如:烷基磺酸盐类,使用长链还是短链?
推荐答案:有水有渝回复于2018/08/06
1、酸性化合物,需调节pH至较高;碱性化合物,需调节pH至较低,这样有利于化合物的充分解离,之后与离子对试剂结合,形成离子对。请教:这样理解是否准确?
答:理解正确,就是在稳定的pH环境下,要让一个带负电、一个带正电,这样才能正负结合。
2、有资料显示:离子对试剂一般不单独使用,而是与磷酸盐共同使用。请教:这是什么原因?有什么好处?两者共用时,各自一般使用多大的浓度?
答:磷酸盐是维护系统的pH稳定,才能稳定两组分的结合力。
3、有网友提到:离子对试剂要慎用,对色谱柱的损害是不可逆的。请教:这是为何?
答:正确,离子对特殊是反相离子对,结构与色谱相的固定相性质比较类似,容易与固定相紧密结合,不容易清洗,同时一些可以与离子对试剂结合的大分子物质很难洗脱出来,久而久之会蓄积在色谱柱中,污染色谱柱。
4、离子对试剂也是种类繁多,我们如何选择?类如:烷基磺酸盐类,使用长链还是短链?
答:根据分离度与保留时间来确定,分子量大保留时间长的可以选择短链的,反之可以选择长链的
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夏天的雪
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还是看一下《实用高效液相色谱分析方法的建立》这本书,里面有提到部分内容
有水有渝
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1、酸性化合物,需调节pH至较高;碱性化合物,需调节pH至较低,这样有利于化合物的充分解离,之后与离子对试剂结合,形成离子对。请教:这样理解是否准确?
答:理解正确,就是在稳定的pH环境下,要让一个带负电、一个带正电,这样才能正负结合。
2、有资料显示:离子对试剂一般不单独使用,而是与磷酸盐共同使用。请教:这是什么原因?有什么好处?两者共用时,各自一般使用多大的浓度?
答:磷酸盐是维护系统的pH稳定,才能稳定两组分的结合力。
3、有网友提到:离子对试剂要慎用,对色谱柱的损害是不可逆的。请教:这是为何?
答:正确,离子对特殊是反相离子对,结构与色谱相的固定相性质比较类似,容易与固定相紧密结合,不容易清洗,同时一些可以与离子对试剂结合的大分子物质很难洗脱出来,久而久之会蓄积在色谱柱中,污染色谱柱。
4、离子对试剂也是种类繁多,我们如何选择?类如:烷基磺酸盐类,使用长链还是短链?
答:根据分离度与保留时间来确定,分子量大保留时间长的可以选择短链的,反之可以选择长链的
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2018/8/6 8:48:13 Last edit by xky0230699
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原文由 有水有渝(xky0230699) 发表:
1、酸性化合物,需调节pH至较高;碱性化合物,需调节pH至较低,这样有利于化合物的充分解离,之后与离子对试剂结合,形成离子对。请教:这样理解是否准确?
答:理解正确,就是在稳定的pH环境下,要让一个带负电、一个带正电,这样才能正负结合。
2、有资料显示:离子对试剂一般不单独使用,而是与磷酸盐共同使用。请教:这是什么原因?有什么好处?两者共用时,各自一般使用多大的浓度?
答:磷酸盐是维护系统的pH稳定,才能稳定两组分的结合力。
3、有网友提到:离子对试剂要慎用,对色谱柱的损害是不可逆的。请教:这是为何?
答:正确,离子对特殊是反相离子对,结构与色谱相的固定相性质比较类似,容易与固定相紧密结合,不容易清洗,同时一些可以与离子对试剂结合的大分子物质很难洗脱出来,久而久之会蓄积在色谱柱中,污染色谱柱。
4、离子对试剂也是种类繁多,我们如何选择?类如:烷基磺酸盐类,使用长链还是短链?
答:根据分离度与保留时间来确定,分子量大保留时间长的可以选择短链的,反之可以选择长链的


非常感谢你的专业认真的解答。
有一种说法是:使用离子对试剂的情况下,系统需要长时间太能达到平衡,以前做药典方法确实也是如此。
而最近使用磷酸盐和离子对试剂共用,发现平衡时间也不需太长时间,这个是否与上述问题2中的加入磷酸盐之后,pH较稳定有关?
有水有渝
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平衡时间与流动相、色谱柱、检测波长都有关,没有确定的时间,一般在一个小时左右,你可以边进样边平衡的,还可以用样品平均色谱柱,同时观察峰形。
Ins_8f07f020
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