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主题：【分享】色谱柱的清洗和再生

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吕梁山
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发表于：2018/08/30 11:04:37 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
色谱柱的清洗和再生
反压升高、保留时间改变、柱效下降，这些表征现象都在提示柱床内或者移动相表层有
沉积物存在。大多数时候，可以按照正确的清洗步骤来处理解决以上问题。值得注意的是，
在大多数情况下越早动手清洗（再生）效果越好。
强吸附性物质总是会停留在色谱柱的溶剂导入端，许多情况下反向冲洗会有助于色谱柱
的清洗。值得指出的是，装填效果好的色谱柱是不会因为逆流操作而降低性能的。
在反相色谱中沉积物通常会以填料床表面吸附物或沉淀的形式存在。对于不同类型的杂
质可采用的冲洗溶剂详见下表：


*作为最后的选择，使用量不超过 10 倍柱体积，操作最后用乙醇/1%水性乙酸（50： 50）酸
化固定相填料。
再生操作步骤：
1. 针对杂质选择合适的溶剂/溶剂混合比。在杂质成分未知时，权当强极性/离子物质情况
处理以防止沉淀的进一步产生。
2. 降低移动相流速（正常流速的 10%），尽可能用反相工作模式并略微提高一点工作温度
（<40℃），冲洗量上限为 10 倍柱体积。
3. 反压出现异常时，选择在常用流速下频繁查看反压的变化情况。
4. 如果问题没有好转，使用针对带正电荷极性和/或大分子沉积物的冲洗条件。如果使用十
二烷基磺酸钠作为冲洗液，事后需用纯四氢呋喃，二甲基甲酰胺或者乙腈对色谱柱做彻
底冲洗。
5. 如果问题顽固存在。请联系我方技术支持寻求进一步帮助。
本文来源于上海鲲霆生物网站
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2018/8/30 21:53:21 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这是应对Kromasil色谱柱的吗？
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吕梁山
shih20j07
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2018/8/31 11:36:26 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wsy18(wsy18) 发表:这是应对Kromasil色谱柱的吗？
对，这个是来源于kromasil的官方代理商网站
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2018/9/11 22:18:01 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
一般再生的柱子柱效多少会有些下降。
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2018/9/16 14:46:14 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
不同厂商的产品方法也会有差异。
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2018/9/17 8:59:12 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wsy18(wsy18) 发表:
一般再生的柱子柱效多少会有些下降。
会有所下降的
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2018/9/17 8:59:39 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wsy18(wsy18) 发表:
不同厂商的产品方法也会有差异。
原理上应该是一样的
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WUYUWUQIU
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2018/9/17 9:01:26 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这个还是有一定技术难度的，普通的检测实验室不一定能操作
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2018/9/17 9:53:53 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 WUYUWUQIU(wulin321) 发表:
会有所下降的
大都还是显著下降。
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2018/9/17 9:55:02 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 WUYUWUQIU(wulin321) 发表:
原理上应该是一样的
但是方法的变化万千。
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WUYUWUQIU
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2018/9/18 11:32:03 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wsy18(wsy18) 发表:
大都还是显著下降。
是的  是显著下降
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