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主题：【求助】氢化可的松高效液相色谱法解决方案——aupos液相

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落紫檀
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发表于：2019/10/26 09:00:33 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
什么是氢化可的松呢？氢化可的松是人工合成也是天然存在的糖皮质激素。
氢化可的松的结构和性质

1、结构中有共轭体系，具有紫外吸收。
2、氢化可的松松3号位上有羰基，可以和生物碱发生沉淀反应。
3、4号位上有双键，可以被高锰酸钾氧化，也可以与溴水发生加成反应。
4、11号位上的羟基可与酸酐或酰氯成酯，利用酯具有一定的熔点，可进行熔点测定，其酯在碱性条件下再与羟胺作用，生成异羟肟酸，并在高铁离子在酸性条件下络合，显紫红色。
5、此结构与硫酸、磷酸、高氯酸等作用呈色。
6、Α-醇酮基与碱性酒石酸铜试液反应成砖红色的氧化亚铜沉淀。
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落紫檀
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2019/10/26 9:02:05 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊



氢化可的松 分子结构式

检测方案
仪器设备：APS80-16Plus高效液相色谱仪（紫外检测器）、APS系列色谱柱、十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，理论板数按醋酸氢化可的松峰计算一般为6000、醋酸氢化可的松与醋酸可的松的分离度应大于5.5。
药品试剂：乙腈（色谱纯）、水（色谱纯）、甲醇
实验原理：供试品经处理后用甲醇溶解并稀释成已定浓度的溶液，进入高效液相色谱仪进行色谱分离，用紫外检测器，于波长254nm处检测醋酸氢化可的松的吸收值，计算出其含量。
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落紫檀
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2019/10/26 9:04:13 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
实验内容
一、色谱条件与系统适应性试验
用甲醇-水（70:30）微流动相；检测波长微240nm，理论板数按氢化可的松的松峰计算不低于2000，氢化可的松峰与内标物质峰的分离度应符合要求。
二、内标溶液的制备
取诀诺酮，加甲醇制备成每1ml中含0.40mg的溶液。
三、对照品溶液的制备
取氢化可的松对照品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释成每1ml中约含0.05mg的溶液。
四、供试品溶液的制备
取本品适量，精密称定，加甲醇溶解并定量稀释成每1ml中约含0.05mg的溶液。
五、测定法
精密量取氢化可的松对照品溶液与内标溶液各5ml，置25ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，取10ul注入液相色谱仪中，记录色谱图，计算校正因子；另取供试品溶液与内标溶液各5ml，同法操作，测定待测成分和内标物质的峰面积，计算即得。

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