主题：【第十三届原创】高效液相色谱法-不同比例溶剂萃取钠钾钙镁注射液里硫、抗氧剂及降解产物回收率变化

                                                                    高效液相色谱法-不同比例溶剂萃取钠钾钙镁注射液里硫、抗氧剂及降解产物回收率变化
                                                                                                                    张永梅
                                                                                                      （重庆市计量质量研究院）

前言：现在我们实验室在做硫及抗氧剂的时候主要涉及到的前处理方法乙腈盐析、乙醇稀释，盐析的比例为1:1、乙醇稀释的比例为1:5，有的药液基质需要达到的检测限会比较小，为了找到能够达到要求合适的检测限，涉及不同梯度的比例，看其对回收率的影响。

1.        实验材料

1.1        标准样品：TNPP、抗氧剂1310、对特辛基酚、抗氧剂BHT、硫、抗氧剂3114、抗氧剂1010、抗氧剂330、抗氧剂1076、等9种组分。

1.2        试剂：乙腈（默克股份两合公司）、乙醇（Fisher Chemical）、甲醇（KnowlES）、磷酸和氯化钠（重庆川东化工有限公司）

1.3        药液：钠钾钙镁注射液

1.4        仪器：LC-20AD 高效液相色谱仪( 日本岛津公司)、SPD-M20A 检测器

1.5        色谱柱：C18柱子

2．实验方法

2.1  色谱条件：
0.10        泵        B.Conc        70
10.00        泵        B.Conc        30
25.00        泵        B.Conc        5
26.00        泵        B.Conc        0
38.00        泵        B.Conc        0
40.00        泵        B.Conc        70
44.00        泵        B.Conc        70
45.00        控制器        Stop       
        流动相A：甲醇  流动相B：0.1%磷酸  流速：0.4ml/min  进样体积：6ul

2.2  前处理方法

2.2.1 乙腈盐析：准确加入2ml、3ml、4ml、5ml、6ml药液，加入相同体积的标准溶液，加入2ml乙腈，加入一定体积的氯化钠，旋涡震荡使其盐析分层，过0.45um滤膜后上机测试。

2.2.2 乙醇稀释：准确加入1ml药液，加入一定体积的标准溶液（使其每个样品加标浓度相等），加入1ml、2ml、3ml、4ml乙腈，旋涡震荡使其混匀，过0.45um滤膜后上机测试。

3.  实验结果及分析

3.1  不同比例乙腈盐析回收率结果：



随着药液体积的增加（水相的体积增加），加入一定量的氯化钠，乙腈在水相的比例增加，导致待测物质回收率偏大。乙腈盐析在该基质为了提高方法的检测限，药液与乙腈的最适比例（1.5:1）。

3.2  不同比例乙醇稀释回收率结果：



随着乙醇体积的增加（有机相的体积增加），有机相比例低的时候，回收率不能达到要求，但随着有机相的比例增加，方法检测限增大，达不到要求，该基质为了降低方法的检测限，药液与乙醇的最适比例（1:3）。