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主题：【已应助】超高液相换不同粒径柱子跑不出来

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Insm_d7083bef
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发表于：2021/04/24 11:28:29 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
求助各位大佬
我们之前用1.7微米粒径跑液相可以跑出来峰
但是换了一个3微米的柱子后液相只能跑出来双头峰
而且我们用超高跑的是绿原酸 标准品他都能出两个峰 绝望
实在是不知道该怎么办了

推荐答案：sdlzkw007回复于2021/04/24
很明显是柱效下降导致的，考虑从1.7到3.0色谱柱转换的流动相组成是否同步调整好。
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sdlzkw007
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2021/4/24 12:32:50 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很明显是柱效下降导致的，考虑从1.7到3.0色谱柱转换的流动相组成是否同步调整好。
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歪果仁zZ
v3255306
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2021/4/24 16:16:30 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
看看是不是色谱柱前、后的连接处出现死体积导致的。
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Insm_d7083bef
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2021/4/24 16:46:51 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sdlzkw007(sdlzkw007) 发表:很明显是柱效下降导致的，考虑从1.7到3.0色谱柱转换的流动相组成是否同步调整好。
我们是新柱子都没怎么跑过
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不怕开水的死猪
m3258404
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2021/4/24 19:24:46 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
描述的不是特别清楚，之前是一个峰吗？有图看下吗
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sacifice
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2021/4/25 8:45:02 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
粒径，流速，流动相配比相互协作的。粒径差了那么多，分离效果肯定差。
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hujiangtao
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2021/4/25 9:01:27 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
1.7比3的柱效高不少的，换成3的需要调整流动相程序
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安平
byron1111
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2021/4/25 22:02:17 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
      有图么？详细说说具体分析条件为好。
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dadgoh
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2021/4/26 8:11:52 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
说一下流动相及流速，估计需要改变一下条件了。
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Insm_d7083bef
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2021/4/26 10:25:01 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dadgoh(dadgoh) 发表:说一下流动相及流速，估计需要改变一下条件了。
流动相是0.1%磷酸水：乙腈
流速0.3
梯度洗脱0min85%磷酸水
2.5min 84%磷酸水 2.675%磷酸水
柱温40℃
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Insm_d7083bef
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2021/4/26 10:27:10 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 安平(byron1111) 发表:              有图么？详细说说具体分析条件为好。
用3微米粒径跑出来的是这种双头峰
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