维权声明:本文为Ins_cbdeca8b原创作品,本作者与仪器信息网是该作品合法使用者,该作品暂不对外授权转载。其他任何网站、组织、单位或个人等将该作品在本站以外的任何媒体任何形式出现均属侵权违法行为,我们将追究法律责任。
色谱柱保留机制研究SiO2-SMA衍生物色谱柱保留机制SiO2-SMA衍生物色谱固定相中具有苯环、烷基链、羧基、酰胺基、酯基等基团。其中苯环和烷基链具有较强疏水性,可使固定相具有反相模式分离性能;羧基、酰胺基和酯基与分析物间存在极性相互作用,可使固定相具有亲水模式分离性能。首先采用疏水性的烷基苯类物质考察了SiO2-SMA-十二醇色谱柱和SiO2-SMA-氨基酸色谱柱的保留机制。如图A和图B所示,5种疏水性逐渐增强的烷基苯类物质(苯、甲苯、乙苯、丙苯和丁苯)在两种色谱柱上的保留呈增强的趋势;另外,随着流动相中乙腈含量由50%增加到80%,烷基苯类化合物在两种色谱柱上保留均逐渐减弱,表现出典型的反相色谱保留模式。进一步采用亲水性的酰胺类物质考察了SiO2-SMA-十二醇色谱柱和SiO2-SMA-氨基酸色谱柱的保留机制。如图C和图D所示,两种色谱柱在高比例有机相条件下均可实现酰胺类物质的有效分离,且随着流动相中含水量增加对其保留减弱,为典型的亲水作用色谱保留模式。因此,两种色谱柱均具有反相/亲水混合模式保留机制。另外,从保留因子来看,SiO2-SMA-十二醇色谱柱对疏水性物质的保留强于SiO2-SMA-氨基酸色谱柱,而SiO2-SMA-氨基酸色谱柱对亲水性物质的保留强于SiO2-SMA-十二醇色谱柱,说明后修饰对于SMAnh的理化性质有较大影响,进而影响了色谱柱的保留行为。![]()
图 流动相中乙腈含量对色谱保留的影响
SiO2-[P888Allyl]Br色谱柱保留机制
由于SiO
2-[P
888Allyl]Br固定相中含有季膦离子,使得固定相具有较强的亲水性;此外,SiO
2-[P
888Allyl]Br固定相中还含有三条辛基侧链,使得SiO
2-[P
888Allyl]Br固定相具有较强的疏水性。选取五种小分子亲水性核苷/核酸碱基和四种疏水性烷基苯考察SiO
2-[P
888Allyl]Br色谱的保留机制。
首先采用亲水性的核苷/核酸碱基类物质,包括胞嘧啶、胞苷、腺苷、尿嘧啶和尿苷对SiO
2-[P
888Allyl]Br色谱柱的保留机制进行考察。如图a所示,随着洗脱液中H
2O含量从5%增加到50%,胞嘧啶、胞苷、腺苷、尿嘧啶和尿苷的保留因子从3.87迅速下降到0.12,表现出典型的亲水色谱保留机制。进一步选取疏水性不同的苯、乙苯、丙苯、丁苯考察填充SiO
2-[P
888Allyl]Br色谱柱的保留机制。从图b可以看出,当洗脱液中ACN含量从40%增加到90%时,苯、乙苯、丙苯、丁苯的保留呈下降趋势,表现出典型的反相色谱保留机制。因此,SiO
2-[P
888Allyl]Br色谱柱表现出亲水/反相混合模式的保留机制。
![]()
图 流动相中水和乙腈含量对亲水性核苷/核酸碱基(a)和疏水性烷基苯类化合物(b)色谱保留的影响