主题：【分享】【金秋计划】分子生物学实验中9种常用酶的作用原理解析

（1）限制性核酸内切酶
一种内切酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并且能在特定的切点上切割DNA，俗称“分子手术刀”。内切酶是重组DNA技术和基因诊断中重要的一类工具酶。
（2）DNA连接酶
DNA酶能利用ATP或NAD+水解提供的能量催化DNA链的5'-磷酸末端与另一DNA链的3'-OH生成3',5'-磷酸二酯键，从而把两个DNA链连接起来。常见实验室常用的DNA连接酶，包括T4 DNA连接酶和Taq DNA连接酶等。
（3）DNA聚合酶
DNA聚合酶主要是催化脱氧核苷酸之间的聚合反应，连接DNA片段与单个脱氧核苷酸之间的磷酸二酯键，在DNA复制中起到关键作用。
DNA聚合酶与DNA连接酶的区别：DNA聚合酶只能将单个核苷酸加到已有的核酸片段的3'末端的羟基上，形成磷酸二酯键；而DNA连接酶是在两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，不是在单个核苷酸与DNA片段之间形成磷酸二酯键。
此外，DNA聚合酶是以一条DNA链为模板，将单个核苷酸通过磷酸二酯键形成一条与模板链互补的DNA链；而DNA连接酶是将DNA双链上的两个缺口同时连接起来，因此，DNA连接酶不需要模板。
（4）RNA聚合酶
RNA聚合酶以完整的双链DNA为模板，转录时DNA的双链结构部分解开，转录后DNA仍然保持双链的结构。常见RNA聚合酶：rRNA、mRNA、tRNA和其它小分子RNA，在RNA复制和转录中起作用。
（5）逆转录酶
逆转录酶具有三种酶活性，即RNA指导的DNA聚合酶、RNA酶、DNA指导的DNA聚合酶。在分子生物学实验中，广泛用于建立基因文库、获得目的基因等工作。
（6）解旋酶
解旋酶是一类解开氢键的酶，通过水解ATP供能，并识别复制叉的单链结构，因此，大部分解旋酶都具有ATP酶的活性。解旋酶大部分移动方向是5'→3'。
（7）核酸酶
核酸酶是指能降解核酸的酶，与聚合酶的功能相反，通过水解或打开在多核苷酸链中的相邻核苷酸的磷酸二酯键内的酯键发挥作用。核酸酶分为内切核酸酶和外切核酸酶，内切核酸酶能水解多核苷酸链中的内部键，而外切核酸酶则必须从末端开始水解反应。
（8）蛋白酶K
蛋白酶K是一种从白色念珠菌分离出来的蛋白溶解酶，具有很高活性，用于质粒或基因组DNA、RNA的分离和抽提。
（9）UNG酶
UNG酶可以选择性水解断裂含有dUTP的双链或单链DNA中的尿嘧啶糖苷键，破坏形成的有缺失碱基的DNA链，从而降低非特异性扩增。