高、低、空白溶剂图谱各位兄弟:
在做一个USP原料药品种
气相色谱检测:用的是自身稀释对照方法如下:
【有关物质】:
测试贮备液A:取本品约 3g置分液漏斗中加水100ml。10分钟后,加0.5N氢氧化钠溶液50ml混匀,用乙醚50ml提取两次,合并提取液。用水20ml洗脱,弃去水层,乙醚层用无水硫酸钠脱水。乙醚层置氮气下蒸发至干,室温下减压干燥2小时。精密称取残渣1.5g,置10ml量瓶中,加乙酸酐-吡啶混合液(5: 95)5.0ml,60℃加热10~15分钟。放冷,用上述混合液稀释至刻度,摇匀。
测试贮备液B:用上述乙酸酐-吡啶混合液稀释测试贮备液A,1:200
色谱系统(色谱法<621>):
气相色谱仪备有火焰-离子化检测器;4-mm × 1-m玻璃管柱:涂布浓度为5%的G17(75%苯基-25%甲基聚硅氧烷)固定液,100~120目的S1AB(硅藻土:酸洗和碱洗)载体,300℃活化24小时。柱温与进样口温度约260℃,检测器温度约300℃。载气为干燥的氦气,流速60ml/min。测试贮备液B重复进样5次的色谱中,相对标准偏差不得过3.0%。
测定法:精密量取同体积(约2µL)的测试贮备液A与测试贮备液B,注入色谱仪,记录相对于主峰的相对保留时间0.1~5.0色谱图,测量测试贮备液A中除溶剂峰与他莫昔芬峰以外的峰面积,并计算这些峰的峰面积和。单个峰面积不得大于测试贮备液B色谱图中他莫昔芬峰面积(0.5%),总峰面积不得大于测试贮备液B色谱图中他莫昔芬峰面积的2倍(1.0%)。
我们的柱子型号是:6-mm × 1-m玻璃管柱:涂布浓度为5%的G17(75%苯基-25%甲基聚硅氧烷)固定液,100~120目的S1AB(硅藻土:酸洗和碱洗)载体,我现在的流速改为了 40ml/min,将柱温改为240℃,因为原来的色谱条件,出峰为2分钟左右。可是问题是填充柱的柱效是150左右,太低了。低浓度供试品是4分钟左右出峰,高浓度在6.395分钟左右出峰,可是低浓度在4.6分钟左右出峰。明显高浓度色谱条件需要优化,可是小弟没有做过填充柱,改怎么优化呢。谢谢大家。