木头回复于2008/05/23
国标方法的话一般是五个点(不包括零浓度);
一般以检出限的5~10倍为第一个点,以后根据1倍(或接近一倍)递增,最高浓度是最低浓度的10~20倍为宜。当然,要根据仪器的灵敏度来调整。
一般方法要求线性大于0.99,其实〉0.99是判断是否为线性相关的一个标准,实际应用中线性 〉0.999才是比较理想的。线性在0.99到0.999之间的监测结果只用接近最高浓度一半(中间浓度)的位置才比较准确,如果线性大于0.999的话,在整个线性范围内都会有一个比较满意的结果。
如果检测的线性不好,可以减少标准的覆盖范围,将标准的浓度调整到待测样品浓度附近,这样结果也是非常准确的。例如,样品的浓度约20ppb,但在0~50ppb范围建立标准曲线,但线性非常不理想,这时可以将标准范围调整到15~25ppb之间,作五个标准。
阿峰回复于2008/05/23
1。标准曲线要在常用浓度范围。
2。窄的区间,对测试来讲越有利。
3。一定在线性范围内。
4。点的分布要均匀。
尐虎ル)ㄣ灬回复于2008/05/24
一.线性关系.现在一般都是用软件.一般要求在0.99以上
二.标准品.一般加上空白.要求在5个点以上(不是越多真好,在五个或六个就可以)(可用二倍或三倍的梯度来选点)
三.IC50要正常
四.曲线的拐点数:三个以内为正常.二个比较好一些
五.校准:可以跟据上边的一些参数.看看那个点远离了,可进行单点校准.
六:分析结果:在求将报测定的结果分布于曲线的第二个点以后,第四个点之上
第曲线的前边或后边的变异比较大,对做重复实验不利.
个人经验只供参考.
loacao回复于2008/05/26
我想根据自己的经验,总结一下标准曲线通常应注意的问题,以求对关键点进行控制:
1.范围:如前面的朋友们所说不能跨度太大,因为标准曲线的高浓度延长线通常是曲线,那样定量会不准。最小点当然可以从LOQ开始。
2. LOQ:对于样品中所含待测物浓度接近或低于最低定量限的,应用LOQ单点校正(欧盟QC规定)。
3. 线性r:对于R值,欧盟没有明确说明,一般质谱中定量用0.99以上才可以接受。
4. 点数:三个以上,多者不限。目前大家都按照梯度配制,是因为便于逐级稀释标样。
5. 原点:一定要注意,标准曲线不一定过原点,尤其是无法获得基质空白的时候。
6. 是否单点校正:一般的说法是通常仪器稳定,认为曲线稳定,所以省略为单点校正。根据欧盟的QC,是可以接受的,但要注意,每隔一定时间考察一下曲线的稳定性。
没有提到的,请大家补充。