OBBA回复于2008/08/18
请问斑竹究竟是做什么寡糖,毕竟寡糖那么多,果寡糖、木寡糖、低聚半乳糖、低聚异麦芽糖、水苏糖、龙胆糖,还是什么,目前我国主要的就有果寡糖、木寡糖、低聚异麦芽糖、水苏糖,几种,提取的方法需要你自己根据样品的成分来做,寡糖大多数不溶于无水乙醇,测试现在我国几个厂家都在用HPLC,但从国外的一些先进仪器来看,如果经费充足可以用近红外分析仪,离子迁移光谱仪。其中离子迁移光谱仪的分析速度可以提高近7倍,分析下限可以达到ng水平,而且也告别了液相用乙腈等危险流动相。
liss576回复于2008/08/22
忘了,再补充一点,呵呵。寡糖一般不溶于90%以上的乙醇。如果用水提醇沉法的话,可以用80%乙醇沉淀,这样沉淀基本为多糖,而上清为寡糖和糖苷类物质。上清浓缩后过大孔树脂就可以了。这样可以避免多糖的干扰。相对方便些。
isomer回复于2008/08/13
没做过寡糖,不知道是不是分光法检测的。
手上有检测方法吗?
金月回复于2008/08/13
磷酸寡糖检测方法的研究
Study on the determination of phosphoryl oligosaccharides
<<食品工业科技 >>2003年12期
毛跟年 , 张嫱 , 杨亚洲 , 许牡丹
实验结果表明,用展开剂正丁醇:乙酸:水=3:1:1,显色剂苯胺-二苯胺-磷酸,点样量为2μg/μL,点样原点直径小于2mm时,可将麦芽糖至麦芽七糖各组分分开,斑点清晰、圆形、无托尾,分离效果好.土豆淀粉中的磷酸寡糖主要含有麦芽三糖、麦芽四糖、麦芽五糖和麦芽六糖,其中平均每四个葡萄糖残基上连接有一个磷酸根.用碱性磷酸酯酶法测定土豆淀粉中的磷酸寡糖,具有样品回收率高、相对误差较小、方法简便、仪器廉价、准确性好等优点,适合于磷酸寡糖常规检验.
关键词: 磷酸寡糖 , 碱性磷酸酯酶 , TLC法 | 全部关键词
原文由 wangboxzzjs 发表:
寡糖的结构分析
到目前为止,已经建立的寡糖结构分析方法有化学法,如甲基化分析、Smith降解、过碘酸氧化、乙酰解、三氧化铬氧化等;物理方法,包括磁共振波谱(1H,13cNMR)、快原子轰击质谱(fast atom bombardment-mass spectroscopy,FABMS);以及生物学方法,主要是酶解分析。而随着现代分析技术的出现与发展,新技术的引入使得糖链的结构分析工作已不再令人生畏。
(a)HPLC,色谱柱TSK2000;洗脱液:水;检测器:示差检测器,流速1 0ml/min
(b)HPCE,仪器所内自制,缓冲液0 09mol/LNaOH,电压18kV,检测器:电流检测器,E=+0 65V(vs.饱和甘汞电极),毛细管长90cm
1、物理方法
⑴质谱
在糖类结构研究的众多分析方法中,质谱被认为是很有前途的手段之一,它灵敏度高、结构信息直观,尤其是20世纪80年代出现的FABMS,使得高极性、难挥发而且热不稳定的糖及其缀合物的直接分析成为可能,质谱技术在最近几年来又取得了飞速的发展。
①电喷雾电离质谱:电喷雾电离质谱是将溶液中分子转变成气相离子的非常有效的手段,这样产生的分子离子往往带有多个电荷,这些离子是靠吸附或失去若干个氢而形成的,所以在正离子或负离子谱上会观测到(M+nH)n+或(M-nH)n-的峰,因此就使ESI-MS可以测定的分子质量范围便大大扩展。图2是我们课题组最近测定牛膝多糖4分子质量分布的ESI-MS图谱(徐愿坚,1996),从中可以明显看到牛膝多糖4中不同分子质量寡糖的分布,人们发现由ESI产生的离子的碎片化反应会因异构体的不同而有所差异,所以寡糖及其缀合物于过碘酸氧化、还原、甲基化前后用ESI-CID联用技术可获得不同的碎片离子,由此能够获知pmol级的寡糖及其缀合物的分子质量、序列、分枝和连接信息[3]。
②基质辅助的激光解吸电离质谱:基质辅助的激光解吸电离质谱技术几乎与ESI同时于20世纪80年代末问世,由于技术上的特点,这种离子化方式电离出的离子常用飞行时间(TOF)检测器来检测,所以MALDI常与TOF连在一起称为基质辅助的激光解吸飞行时间质谱仪。它也是一种"软电离"方式,产生的分子离子稳定,不易裂解,适用于测定大分子质量的生物样品。与蛋白质和糖蛋白通常给出强的[M+H]-离子之外还给出较弱的双电荷或多电荷离子不同的是,中性寡糖分子仅给出单一的[M+Na]+离子峰。此外,MALDI方式不受样品中所含添加剂、缓冲液或盐类的影响,其灵敏度也是各类电离方式中最高的[4]。
图2 牛膝多糖-4的ESI-MS图 括号中数字为寡糖的聚合度,()表示是单电荷分子离子,[]表示是双电荷分子离子