主题:【讨论】移动相含有Buffer正确配法为何

浏览0 回复9 电梯直达
ccyiyicc
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请问各位专家
IF 移动相:Buffer:0.02M KH2PO4 (PH=3)/ Atonitrile=1/1正确配法为何?原因为何?
  (1) Buffer配完(pH=3)后,先用0.45um或0.22um滤膜过滤+ Atonitrile混合均匀即可
  (2) Buffer配完(pH=3)后+ Atonitrile混合,再用0.45um或0.22um滤膜过滤后再混合均匀即可
  (3) Buffer配完(pH未调好) + Atonitrile混合,再用0.45um或0.22um滤膜过滤后再调pH=3
  (4)以上皆可
  (5)以上皆非
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有水有渝
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严格来说是按第一种,且缓冲液和有机相都要分别过滤再混合,这跟滤膜的性质有关.不过配制高有机相比例流动相时,也可用第二种,怕有盐析出,不过可能会影响滤膜.
happy王子矜
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这些东西对实际应用影响很小。我都是先配好一样。因为是双泵或四元泵啊。都按二三的配法,双泵或四元泵的怎么办啊。
maples
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原文由 ccyiyicc 发表:
请问各位专家
IF 移动相:Buffer:0.02M KH2PO4 (PH=3)/ Atonitrile=1/1正确配法为何?原因为何?
  (1) Buffer配完(pH=3)后,先用0.45um或0.22um滤膜过滤+ Atonitrile混合均匀即可
  (2) Buffer配完(pH=3)后+ Atonitrile混合,再用0.45um或0.22um滤膜过滤后再混合均匀即可
  (3) Buffer配完(pH未调好) + Atonitrile混合,再用0.45um或0.22um滤膜过滤后再调pH=3
  (4)以上皆可
  (5)以上皆非


选1
按您的描述最正确的方法只有1
2的描述问题在于混合后的流动相只能采用油溶性的过滤膜过滤,而油溶性的过滤膜从原理上来说是疏水的,不会很彻底的过滤掉水中的杂质
3的描述是混合后调节ph值,但这种方法不容易精确控制每次的pH值,重现性差
制备液相
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happy_horse1126
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原文由 elite_wfl 发表:
原文由 ccyiyicc 发表:
请问各位专家
IF 移动相:Buffer:0.02M KH2PO4 (PH=3)/ Atonitrile=1/1正确配法为何?原因为何?
  (1) Buffer配完(pH=3)后,先用0.45um或0.22um滤膜过滤+ Atonitrile混合均匀即可
  (2) Buffer配完(pH=3)后+ Atonitrile混合,再用0.45um或0.22um滤膜过滤后再混合均匀即可
  (3) Buffer配完(pH未调好) + Atonitrile混合,再用0.45um或0.22um滤膜过滤后再调pH=3
  (4)以上皆可
  (5)以上皆非


选1
按您的描述最正确的方法只有1
2的描述问题在于混合后的流动相只能采用油溶性的过滤膜过滤,而油溶性的过滤膜从原理上来说是疏水的,不会很彻底的过滤掉水中的杂质
3的描述是混合后调节ph值,但这种方法不容易精确控制每次的pH值,重现性差


难道您没听说过尼龙滤膜是两性的吗?
正确的做法是2。
1、问题在于混合时可能有高亲水性盐晶体析出,所以如果先过滤的话析出的晶体就无法除去。
3、问题在于盐在纯的有机溶剂中是不电离的,因此也无从谈起PH值的问题,所以调PH值应该是在纯水相中调。
知足常乐!
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原文由 happy_horse1126 发表:
原文由 elite_wfl 发表:
原文由 ccyiyicc 发表:
请问各位专家
IF 移动相:Buffer:0.02M KH2PO4 (PH=3)/ Atonitrile=1/1正确配法为何?原因为何?
  (1) Buffer配完(pH=3)后,先用0.45um或0.22um滤膜过滤+ Atonitrile混合均匀即可
  (2) Buffer配完(pH=3)后+ Atonitrile混合,再用0.45um或0.22um滤膜过滤后再混合均匀即可
  (3) Buffer配完(pH未调好) + Atonitrile混合,再用0.45um或0.22um滤膜过滤后再调pH=3
  (4)以上皆可
  (5)以上皆非


选1
按您的描述最正确的方法只有1
2的描述问题在于混合后的流动相只能采用油溶性的过滤膜过滤,而油溶性的过滤膜从原理上来说是疏水的,不会很彻底的过滤掉水中的杂质
3的描述是混合后调节ph值,但这种方法不容易精确控制每次的pH值,重现性差


难道您没听说过尼龙滤膜是两性的吗?
正确的做法是2。
1、问题在于混合时可能有高亲水性盐晶体析出,所以如果先过滤的话析出的晶体就无法除去。
3、问题在于盐在纯的有机溶剂中是不电离的,因此也无从谈起PH值的问题,所以调PH值应该是在纯水相中调。

我个人认为选1
因为2在过滤的时候,有机相回挥发,导致了流动相比例改变
深海游鱼
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happy王子矜
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这些东西影响很小,只是细微比例的差别,在非常苛刻的条件下,不选二方法就好,也就是因为抽虑时候有机相挥发的比例不一定,在多次检验中引起保留时间的偏移。但是这种情况出现的几率也很低。

一个别人给的条件,你不可能仿的一模一样,过于注重这些细节完全没有任何必要。应该注意的,是方法中要求的分离度,柱效等系统适用性参数,它们对你结果才会有影响。流动相比例如果不合适你自己都要修改的,前面你费功夫研究它有什么意义啊。保证均一性就好。用稳定的方法每次都这样操作就可以了。

希望不再讨论这个问题了。真的没有技术含量的问题。
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