主题：【求助】替硝唑的极性

替硝唑片含量测定方法
2005《中国药典》替硝唑片含量测定项下：
    色谱条件与系统适用性试验：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以0.05mol/L磷酸二氢钠溶液（用磷酸调节pH值至3.5）-甲醇（80：20）为流动相；检测波长为310nm。理论板数按替硝唑峰计算不低于2000，替硝唑峰与相邻杂质峰的分离度应符合要求。
    供试品溶液的制备：取本品10片，精密称定，研细，精密称取适量（约相当于替硝唑120mg），置100ml量瓶中，加流动相适量，振摇使替硝唑溶解，加流动相稀释至刻度，摇匀，精密量取续滤液5ml，至50ml量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。
    文献报道常用的实验条件，如：
    陈恭铭用HPLC法测定替硝唑片的含量。仪器：Agilent1100 液相色谱仪。色谱柱为Hypersil (250mm×4.0mm；5μm)；流动相：甲醇-水(20：80)；检测波长316nm；流速： 1ml/min；柱温室温。供试品溶液的制备方法同药典。
    郭琪等用HPLC法测定替硝唑片的含量。仪器：BIO-BAD-1350t 高效液相色谱仪。色谱柱为ZORBAX，SB-C18 (4.6×150mm×5μm)；流动相：乙腈-1%醋酸溶液(20：80) (pH3.5) 使用前超声脱气；流速1.0ml/min；紫外检测波长为278nm；检测灵敏度为0.04AUFS，室温操
作。

复方替硝唑中空泡腾栓有效成分含量测定
复方替硝唑中空泡腾栓是含替硝唑与氟罗沙星及泡腾剂的自制栓剂［1］。氟罗沙星是第三代喹诺酮类抗菌药，具有抗菌谱广、抗菌性强、穿透力强的特点［2］。该复方替硝唑中空泡腾栓主要用于治疗细菌性、霉菌性、滴虫性阴道炎。因替硝唑和氟罗沙星紫外吸收光谱互有重叠，采用等吸收双波长法同时测定栓剂中替硝唑、氟罗沙星两组分含量，方法简单可靠，重现性好。
　　1  材料与方法

    1.1  材  料
    UV1200型紫外分光光度计（北京瑞利仪器厂）；中空栓模，自制；氟罗沙星（上海第二医科大学提供）；替硝唑（湖北广济制药厂）；复方替硝唑中空泡腾栓，自制。
  1.2  测定条件的选择
    精密称取替硝唑、氟罗沙星、栓剂基质适量，分别用甲醇二氯甲烷（1∶1）进行溶解，配得浓度为
    作者简介：高红旺(1968－)，男(汉族)，实验师，大专.
    12.8 μg/ml替硝唑溶液、5.24μg/ml氟罗沙星溶液及基质溶液，分别在波长200～400 nm之间扫描获得基质、替硝唑、氟罗沙星及三者混合液的紫外吸收光谱图。
    1.3  标准曲线的绘制
    精密称取干燥至恒重的氟罗沙星19.3 mg与替硝唑50.3 mg，用甲醇二氯甲烷（1∶1）溶解，并定容至50 ml中，精密吸取2.5 ml稀释至100 ml，再精密吸取1、2、3、4、5、6 ml，分别用甲醇二氯甲烷（1∶1）溶解并定容至10 ml，分别得到氟罗沙星浓度为0.96、1.93、2.90、3.86、4.82、5.79 μg/ml和替硝唑浓度为2.52、5.03、7.54、10.06、12.58、15.09 μg/ml一系列标准品混合液。以甲醇二氯甲烷（1∶1）为空白，按样品含量测定方法同时测定标准品混合液中氟罗沙星和替硝唑的吸收度，分别以替硝唑、氟罗沙星的浓度为横坐标，以各自的吸收度为纵坐标，进行直线回归分析。
    1.4  精密度试验
    配制替硝唑浓度为10 μg/ml、氟罗沙星为4 μg/ml的混合溶液按样品含量测定方法同时测定6次氟罗沙星与替硝唑的吸收度。
    1.5  回收率试验
    按复方替硝唑中空泡腾栓处方中各组分的比例精密称取替硝唑、氟罗沙星、基质、泡腾剂适量，用甲醇二氯甲烷（1∶1）溶解，分别测定氟罗沙星、替硝唑的吸收度，计算回收率。
    1.6  样品含量测定
    取复方替硝唑中空泡腾栓10枚，精密称重后，置蒸发皿中，在水浴上温热熔融，充分搅拌均匀，冷却后切碎精密称取适量（约含替硝唑50 mg、氟罗沙星20 mg），置于100 ml烧杯中，在水浴中将样品熔融，加入甲醇二氯甲烷（1∶1）40 ml，不断搅拌使溶解完全，定容至50 ml。精密吸取1 ml，用甲醇二氯甲烷（1∶1）稀释并定容至50 ml，用甲醇二氯甲烷（1∶1）作空白，测定样品溶液中替硝唑与氟罗沙星的吸收度，代入回归方程，计算浓度，从而计算标示量百分含量。
  2  结  果
    2.1  测定条件选择结果
    基质不干扰替硝唑与氟罗沙星的吸收。氟罗沙星在288.0 nm有最大吸收，替硝唑在312.5 nm处有最大吸收，且两药的吸收光谱互有重叠。在氟罗沙星的最大吸收波长288.0 nm处，替硝唑也有吸收，它的等吸收参比波长为335.0 nm，通过等吸收双波长法可消除替硝唑对氟罗沙星的干扰，即：A氟＝A混288.0-A混335.0。在替硝唑最大吸收波长312.5 nm处，氟罗沙星也有吸收，它的等吸收参比波长为268.9 nm，通过等吸收双波长可消除氟罗沙星对替硝唑的干扰，即：A替＝A混312.5-A混268.9。测定紫外吸收光谱图，绘制标准曲线，替硝唑的回归方程为A＝0.03187C-0.05607（r＝0.999，n＝6，浓度范围2.5～15μg/ml）；氟罗沙星的回归方程为A＝0.05946C+0.03007（r＝0.995，n＝6，浓度范围1～6μg/ml）。
    2.2  精密度试验结果
    测得氟罗沙星的RSD为0.48%，替硝唑的RSD为0.44%。
    2.3  回收率试验结果
    替硝唑平均回收率为99.08%，RSD为1.02%；氟罗沙星平均回收率为99.72%，RSD为0.95%。各样品测定结果，详见表1，其中1～5号为替硝唑，6～10号为氟罗沙星。表1  样品中替硝唑和氟罗沙星的含量测定结果
    2.4  样品含量测定结果
    样品中替硝唑和氟罗沙星的标示量百分含量测定结果，详见表2。表2  样品标示量百分含量测定结果
    3  讨  论
选用甲醇二氯甲烷（1∶1）作溶剂，两种药物及所用的脂溶性基质均能溶解，避免了因基质不溶吸附药物而使回收率降低的缺点，且进行了空白基质试验，在测定波长下无干扰。样品测定时，在蒸发皿上温热熔融，一定要搅拌均匀后再冷却，冷却后全部切碎，再精密称重取样，否则影响测定结果的准确性。
【参考文献】
  ［1］ 张秀荣，许英爱.复方替硝唑中空泡腾栓的研制［J］.沈阳药科大学学报，2001，18（4）：254259.
［2］ 张雷，李欣.复方氟罗沙星滴耳液的制备及临床应用［J］.中国药房，2001，12（8）：468469.

thank you.其实我想知道它的气相色谱行为，是否能用DB-5ms柱子分离