主题:【求助】请教:新柱子性能如何评价

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sail2003
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请教高手们  如何评价一根新液相色谱柱的性能好坏啊?是看峰宽么?有没有一个比较权威的解释呢?前几天想买一根新柱,但老板说要先试用一下那公司的柱子,所以就让他们邮寄了一根试用柱过来,但那柱子有些旧了,走的效果不是很好,现在就很迷茫了 不知道能不能买他们公司的这个类型的柱子了...
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色谱柱性能评价包括很多内容,比如色谱柱的分离效率、对指定溶质的选择性、在不同PH介质中的稳定性、重现性、色谱柱压力、柱子的样品负载量、回收率等等。
通常,以指定的一组标准溶质为样品,测定他们在柱子上的理论塔板数,作为柱效的衡量指标。
理论塔板数的测定请参照其他资料,网上也有。
〓猪哥哥〓
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原文由 wangboxzzjs 发表:
色谱柱性能评价包括很多内容,比如色谱柱的分离效率、对指定溶质的选择性、在不同PH介质中的稳定性、重现性、色谱柱压力、柱子的样品负载量、回收率等等。
通常,以指定的一组标准溶质为样品,测定他们在柱子上的理论塔板数,作为柱效的衡量指标。
理论塔板数的测定请参照其他资料,网上也有。


⊕理论塔板数(theoretical plate number,N)用于定量表示色谱柱的分离效率(简称柱效)。
N取决于固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布,N可近似表示为:
N=(tR/σ)2=16(tR)2/W =5.54(tR/W1/2)2
W:峰宽 ; σ:曲线拐点处峰宽的一半,即峰高0.607处峰宽的一半。
N为常量时,W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上,如果各组份含量相当,则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽,峰高则逐渐降低。
用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用,因为半峰宽更容易准确测定,尤其是对稍有拖尾的峰。
N与柱长成正比,柱越长,N越大。用N表示柱效时应注明柱长,,如果未注明,则表示柱长为1米时的理论塔板数。(一般HPLC柱的N在1000以上。)
若用调整保留时间(tR’)计算理论塔板数,所得值称为有效理论塔板数(N有效或Neff)=16(tR’/W)2
⊕理论塔板高度(theortical plate height,H)每单位柱长的方差。H=。实际应用时往往用柱长L和理论塔板数计算:H=L/N


通常意义来说,塔板数越多越好。

阿图
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看看自己要分析的东西是否适合柱子吧
既然有柱子试试,就用将来用检测的样品看看能否分开,分开的效果如何的。
再看看说明书,压力,ph值是否在所需要的范围内
通过了,一般都没问题。
sail2003
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原文由 tfchen 发表:
看看自己要分析的东西是否适合柱子吧
既然有柱子试试,就用将来用检测的样品看看能否分开,分开的效果如何的。
再看看说明书,压力,ph值是否在所需要的范围内
通过了,一般都没问题。

呵呵 谢谢 其实我拿到的这根柱子提供商说是一根老柱,而且分离我的混合对照品时会拖尾,峰宽在0.12左右,对称因子在0.75左右,在这里就是想了解一下一般柱子峰宽是不是有一个合适的可接受范围像对称因子在0.95-1.05那样,所以请下次准备买新柱的同志们一定注意了:试用柱不能太旧了,要不然会让你不好判断是不是柱子真的不适合你的样品的分离...
qingqingcao
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原文由 sail2003 发表:
请教高手们  如何评价一根新液相色谱柱的性能好坏啊?是看峰宽么?有没有一个比较权威的解释呢?前几天想买一根新柱,但老板说要先试用一下那公司的柱子,所以就让他们邮寄了一根试用柱过来,但那柱子有些旧了,走的效果不是很好,现在就很迷茫了 不知道能不能买他们公司的这个类型的柱子了...

我以前是装分析色谱柱的。一般是用萘以甲醇:水70:30或乙腈:水70:30测试它的塔板数,和对称因子。
塔板数好像是大于8万/米。对称因子0.9-1.1间。
汾阳王
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楼主可以跟让供货商随柱发标准谱图和测试标样,按照谱图上所给条件分析测试标样,比较谱图以及各项参数,如和标准谱图上差别较大,可以要求换货或者退货,这点可以在合同里注明,最好是让供货商派一个人过来现场验货,这样质量可以得到保障!
sail2003
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原文由 qingqingcao 发表:
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请教高手们  如何评价一根新液相色谱柱的性能好坏啊?是看峰宽么?有没有一个比较权威的解释呢?前几天想买一根新柱,但老板说要先试用一下那公司的柱子,所以就让他们邮寄了一根试用柱过来,但那柱子有些旧了,走的效果不是很好,现在就很迷茫了 不知道能不能买他们公司的这个类型的柱子了...

我以前是装分析色谱柱的。一般是用萘以甲醇:水70:30或乙腈:水70:30测试它的塔板数,和对称因子。
塔板数好像是大于8万/米。对称因子0.9-1.1间。

谢谢指点,我想先说服老师买这柱子。个人认为,作为一根老柱能有这样的效果就已经不错了,但是如果是使用新柱 那在开始第一次冲柱我需要注意些什么问题吗?因为我流动相中用到了酸。请再次指点...
qingqingcao
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我以前是装分析色谱柱的。一般是用萘以甲醇:水70:30或乙腈:水70:30测试它的塔板数,和对称因子。
塔板数好像是大于8万/米。对称因子0.9-1.1间。

谢谢指点,我想先说服老师买这柱子。个人认为,作为一根老柱能有这样的效果就已经不错了,但是如果是使用新柱 那在开始第一次冲柱我需要注意些什么问题吗?因为我流动相中用到了酸。请再次指点...

旧柱子也可以修复。新柱子可以按照说明书上的条件测试。
C18  15cm 25cm的可以用萘的乙腈溶液(5mg/l),用上述条件,F=1ml/min,254nm测试对称性,柱效。5um-15cm 大于8万。0.95-1.05对称。
5um-25cm 大于12万  0.95-1.05
qingqingcao
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C18的可以 先用纯水:甲醇=50:50清洗或无盐比例的流动相0.5ml/min 清洗2小时。然后更换成流动相。
fde234
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最好是根据柱子说明书里面相同色谱条件和对照品来做看看能不能达到相应塔板数
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