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液相色谱（LC）
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主题：【求助】两年多没用的制备柱如何冲洗？

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发表于：2008/11/20 08:57:34 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
新接手的一台Gilson的分析兼制备型的高效液相色谱，因为仪器很少有用，配的制备柱已经有两年多没有用过。但最近有课题组想用，可是我怕柱子里面已经干掉，会有断层，不知道大量溶剂冲洗能否恢复柱效？如果冲洗的话，用什么比例的溶剂冲洗效果会好一些呢？请各位大侠支支招，谢谢啦～～
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lianlxh
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2008/11/20 15:44:05 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平衡色谱柱
反相色谱柱在经过出厂测试后是保存在乙腈/水中的。请一定确保您所使用的流动相和乙腈/水互溶。由于色谱柱在储存
或运输过程中可能会干掉，因此在用流动相分析样品之前，应使用10－20倍柱体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱；如果您所
使用的流动相中含有缓冲盐，应注意用纯水"过渡"。
　　硅胶柱或极性色谱柱在经过出厂测试后是保存在正庚烷中的。如果该色谱柱需要使用含水的流动相，请在使用流动相
之前用乙醇或异丙醇平衡
如何平衡色谱柱？

平衡过程中，将流速缓慢地提高


用流动相平衡色谱柱直到获得稳定的基线（缓冲盐或离子对试剂度如果较低，则需要较长的时间来平衡）





极性固定相（如Si，NH2*，DIOL基色谱填料）的再生：
正庚烷→氯仿→乙酸乙酯→丙酮→乙醇→水**


非极性固定相（如反相色谱填料RP－18，RP－8，CN等）的再生：


水→乙腈→氯仿（或异丙醇）→乙腈→水


0.05M稀硫酸可以用来清洗已污染的色谱柱


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It is me!
hmzhou83
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2008/11/20 16:38:45 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很是佩服1楼的说得很详细.

我建议冲洗后,用检测柱子的物质再检测几次.
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制备液相
wzl-x
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2008/11/21 16:28:59 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
用小流速的甲醇长时间冲洗，由于时间太久，柱头不排除已经风干塌陷的可能性。记住流速一定要小，1ml/min就可以，过夜，充分浸润饱和。
然后用萘，进行柱效测试。
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