主题:【求助】请教关于阴离子交换柱的问题

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wychtao
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最近做草甘膦的分析,按国标中的做法是SAX柱,磷酸二氢钾和磷酸配制缓冲液(PH=2),在195nm处检测。
因为该波长处吸收比较弱,干扰也严重,现在考虑用蒸发光散射器检测,但蒸发光散射器就不能用不挥发的物质做流动相,磷酸二氢钾和磷酸都不能用,所以考虑换用其他的酸来调PH,目前试了甲酸,乙酸,三氟乙酸都不行,都没有出峰,不知道是酸度不够,还是洗脱能力不够。所以有几个问题请教各位高手:
1 流动相的洗脱能力是不是跟所用的缓冲盐有很大关系,比方上面国标用磷酸盐,我用其它的来调PH,即使调到PH=2也不能达到理想分离效果。
2 用SAX柱时,阴阳离子是单独出峰的吗?如果我你的样品中有无机盐,比如氯化钠,是不是氯离子和钠离子各出一个峰呢?这个问题比较白痴,但我真想不通啊!
3 有没有做过这个的,给点指点啊,以前没用过这中柱子,临时抱佛脚看了点资料也没看懂,很笨的说,
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原文由 wychtao 发表:
最近做草甘膦的分析,按国标中的做法是SAX柱,磷酸二氢钾和磷酸配制缓冲液(PH=2),在195nm处检测。
因为该波长处吸收比较弱,干扰也严重,现在考虑用蒸发光散射器检测,但蒸发光散射器就不能用不挥发的物质做流动相,磷酸二氢钾和磷酸都不能用,所以考虑换用其他的酸来调PH,目前试了甲酸,乙酸,三氟乙酸都不行,都没有出峰,不知道是酸度不够,还是洗脱能力不够。所以有几个问题请教各位高手:
1 流动相的洗脱能力是不是跟所用的缓冲盐有很大关系,比方上面国标用磷酸盐,我用其它的来调PH,即使调到PH=2也不能达到理想分离效果。
2 用SAX柱时,阴阳离子是单独出峰的吗?如果我你的样品中有无机盐,比如氯化钠,是不是氯离子和钠离子各出一个峰呢?这个问题比较白痴,但我真想不通啊!
3 有没有做过这个的,给点指点啊,以前没用过这中柱子,临时抱佛脚看了点资料也没看懂,很笨的说,
     

你的洗脱液中需要强阴离子,ANCL是不参加反应的吧,更多请咨询柱子厂家,
nnsss
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理论上应该用TRIS-HCL作为缓冲液,但是他的沸点太高,估计蒸发光用不了,
It is me!
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buffer的作用不仅仅是调节pH的,其盐离子有时候会和待测物质有作用的.
因此,你虽然pH调了,但是可能没有盐离子的作用了.

以上我推测的.

Na和Cl离子在冲洗过程中就下来了.估计你检测不到的.
wychtao
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既然冲洗下来了,为什么检测不到呢,想不通啊,能不能指点一下啊?既然是阴离子交换柱,是不是所有的阴离子都会在上面保留,淋洗,然后被检测到呢?谢谢!
wychtao
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原文由 hmzhou83 发表:
buffer的作用不仅仅是调节pH的,其盐离子有时候会和待测物质有作用的.
因此,你虽然pH调了,但是可能没有盐离子的作用了.

以上我推测的.

Na和Cl离子在冲洗过程中就下来了.估计你检测不到的.

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我看到资料上也说缓冲盐一要用的,目前想到能用的盐只有乙酸铵,添加乙酸铵后再用甲酸,乙酸调节PH,但效果也不理想,不知道是不是乙酸铵的阴离子不够强呢?
既然冲洗下来了,为什么检测不到呢,想不通啊,能不能指点一下啊?既然是阴离子交换柱,是不是所有的阴离子都会在上面保留,淋洗,然后被检测到呢?谢谢!
blaghair
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对于您的第2个问题回答如下:
由于是SAX柱子,固定相表面是带正电荷的,这样,钠离子不保留,在水峰处流出;而氯离子在水峰后流出,要用合适的检测器检测(如电导检测)。





原文由 wychtao 发表:
最近做草甘膦的分析,按国标中的做法是SAX柱,磷酸二氢钾和磷酸配制缓冲液(PH=2),在195nm处检测。
因为该波长处吸收比较弱,干扰也严重,现在考虑用蒸发光散射器检测,但蒸发光散射器就不能用不挥发的物质做流动相,磷酸二氢钾和磷酸都不能用,所以考虑换用其他的酸来调PH,目前试了甲酸,乙酸,三氟乙酸都不行,都没有出峰,不知道是酸度不够,还是洗脱能力不够。所以有几个问题请教各位高手:
1 流动相的洗脱能力是不是跟所用的缓冲盐有很大关系,比方上面国标用磷酸盐,我用其它的来调PH,即使调到PH=2也不能达到理想分离效果。
2 用SAX柱时,阴阳离子是单独出峰的吗?如果我你的样品中有无机盐,比如氯化钠,是不是氯离子和钠离子各出一个峰呢?这个问题比较白痴,但我真想不通啊!
3 有没有做过这个的,给点指点啊,以前没用过这中柱子,临时抱佛脚看了点资料也没看懂,很笨的说,
rainbowchem
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最近做草甘膦的分析,按国标中的做法是SAX柱,磷酸二氢钾和磷酸配制缓冲液(PH=2),在195nm处检测。
因为该波长处吸收比较弱,干扰也严重,现在考虑用蒸发光散射器检测,但蒸发光散射器就不能用不挥发的物质做流动相,磷酸二氢钾和磷酸都不能用,所以考虑换用其他的酸来调PH,目前试了甲酸,乙酸,三氟乙酸都不行,都没有出峰,不知道是酸度不够,还是洗脱能力不够。所以有几个问题请教各位高手:
1 流动相的洗脱能力是不是跟所用的缓冲盐有很大关系,比方上面国标用磷酸盐,我用其它的来调PH,即使调到PH=2也不能达到理想分离效果。
2 用SAX柱时,阴阳离子是单独出峰的吗?如果我你的样品中有无机盐,比如氯化钠,是不是氯离子和钠离子各出一个峰呢?这个问题比较白痴,但我真想不通啊!
3 有没有做过这个的,给点指点啊,以前没用过这中柱子,临时抱佛脚看了点资料也没看懂,很笨的说,

伙计,别用国标了,国标根本就不行。我们也用过,根本就不出峰,估计是流动相的配比的问题。
你们是用的哪家的柱子?
wyp198
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我们做的还是可以的,不过我们是ph跳到1.9出峰时间大约是8min左右
swenxiong
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原文由 wyp198 发表:
我们做的还是可以的,不过我们是ph跳到1.9出峰时间大约是8min左右


那可不可以把您的所做出来的资料发给我吗!
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