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主题：【求助】脂类提取物进样前处理

浏览0 回复14 电梯直达
wangtaofrank
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发表于：2009/01/05 15:42:42 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用ESI-MS/MS检测植物叶片中磷脂和糖脂成分,经过初步提取的总脂提取物用什么方法除去蛋白质等干扰,然后用质谱检测?谢谢!
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2009/1/5 17:23:15 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你的基质含什么比较的多，使用过滤器可以过滤可以，一般的使用针筒式过滤器过滤就可以了，如果是有机的比较多就使用有机过滤膜过滤就好！
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2009/1/5 19:24:19 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我提取的是小麦叶子的脂类，我委托我们这的分析中心检测，他们说直接没经过前处理，蛋白质之类的杂质太多，容易污染仪器，要经过柱子进行初步处理才能做质谱。我就问用什么柱子处理？哪个公司有卖的？
    我看国外人家做的，不用做前处理，直接过滤上质谱就行。没办法，用人家的仪器，得遵照人家的意思做。
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aifenxi
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2009/1/5 19:46:35 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wangtaofrank 发表:
我提取的是小麦叶子的脂类，我委托我们这的分析中心检测，他们说直接没经过前处理，蛋白质之类的杂质太多，容易污染仪器，要经过柱子进行初步处理才能做质谱。我就问用什么柱子处理？哪个公司有卖的？
    我看国外人家做的，不用做前处理，直接过滤上质谱就行。没办法，用人家的仪器，得遵照人家的意思做。


我们是做农残分析的,用SPE净化,比如用Carb除色素,用氨基除杂质(蛋白质可除掉),氨基除油不行,不知道您提取的目标物会不会被氨基吸附掉,要试试才知道.
该帖子作者被版主 lxdongzi2003加 2积分， 2经验，加分理由：积极回复网友提问！
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tianru的爸爸
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2009/1/6 8:29:44 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
对于脂类物质的萃取，可以用氯仿类溶剂，然后再用常温干燥法（不超过50度）把脂蛋白的蛋白成分变性，最后再用氯仿类溶剂溶解，就不会有蛋白类成分了。

如果嫌氯仿（三氯甲烷）毒性太大，可以用二氯甲烷代替。
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wangtaofrank
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2009/1/6 11:12:48 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼上的专家，能给我提供你介绍你所说的方法的文献吗？ 其实我就是按你说的那么做的（我用的是氯仿：甲醇，2：1提取，氮气吹干再用氯仿溶解，参照Kansas University，Ruth Welti的方法），但我送去检测的人说，没经过过柱前处理，会有蛋白质污染，让我过柱再给做。有这方面的资料的话给我发一份行吗？
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Last edit by wangtaofrank
tianru的爸爸
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2009/1/6 11:35:19 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wangtaofrank 发表:
我用的是氯仿：甲醇，2：1提取，氮气吹干再用氯仿溶解，参照Kansas University，Ruth Welti的方法

在氮气吹干的时候用45度左右的温度干燥15分钟（但必须是你的目标物在这时不易升华）；
还有最好过一下柱子，因为萃取时是用了大量萃取液，而浓缩过程把很多痕量杂质（主要是不挥发性的）也被浓缩了，可能还会影响后面的分析。
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xumu2009
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2009/1/7 11:21:58 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 lxdongzi2003 发表:
原文由 wangtaofrank 发表:
我用的是氯仿：甲醇，2：1提取，氮气吹干再用氯仿溶解，参照Kansas University，Ruth Welti的方法

在氮气吹干的时候用45度左右的温度干燥15分钟（但必须是你的目标物在这时不易升华）；
还有最好过一下柱子，因为萃取时是用了大量萃取液，而浓缩过程把很多痕量杂质（主要是不挥发性的）也被浓缩了，可能还会影响后面的分析。

楼上前辈你好！我刚做完几个样品的脂质提取，用得是氯仿甲醇溶解，用旋转蒸发仪蒸干，但是得出来的不是油脂，而是有色素的东西，粘附在烧瓶壁上。我想请问去除色素干扰的具体方法是什么？还有什么是柱子过滤？能把这方面的资料给我发一份吗？我的邮箱是shlao1222@126.com！谢谢
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xumu2009
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2009/1/7 11:31:46 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 wangtaofrank 发表:
楼上的专家，能给我提供你介绍你所说的方法的文献吗？ 其实我就是按你说的那么做的（我用的是氯仿：甲醇，2：1提取，氮气吹干再用氯仿溶解，参照Kansas University，Ruth Welti的方法），但我送去检测的人说，没经过过柱前处理，会有蛋白质污染，让我过柱再给做。有这方面的资料的话给我发一份行吗？
我的邮箱是;wangtaofrank@163.com QQ:276693046。谢谢了！

你好，我和你做同样的实验，不过我的对像是动物，能把你的提取方法发给我参考参考吗？我的邮箱shlao1222@126.com
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雾非雾
mcds
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2009/1/7 11:42:42 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
植物的提取液除色素一般是用Carb.
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wangtaofrank
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2009/1/7 16:00:07 11楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我是直接进质谱分析，不用连接液相色谱，也要把色素除去吗？ 色素对质谱有干扰没？谢谢！
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