主题:【求助】峰分不开,是柱子的原因吗?

浏览0 回复24 电梯直达
rurub
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以前做的标样,峰分离得很好,最近不知道为什么同样的方法,同样的物质,峰却分叉了,原来条件是水,甲醇,乙腈=65:25:10的等度梯度,分析时间为15分钟,现在的条件是以上比例等度洗脱五分钟然后五分钟内变化到10:25:65,再等度五分钟,最后五分钟变化到初始条件,总分析时间是20分钟,出峰时间在7.3分左右,但峰型和保留时间变化很小,是否柱子也会引起这种问题,特此请教各位老师的意见。附上谱图,黒线是原来的峰,红线是不变条件不变物质的谱图,绿线是梯度洗脱的峰,三个都是标样的谱图。

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不一定,梯度变化时,基线波动会有一个波动峰出现
阿du
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为什么要改条件?
前后的图谱最好发上来比较一下。
Easy-Boy
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含量高了,降低浓度,柱子平衡不好,多做流动相平衡。
rurub
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问题是我原来是等度洗脱,峰分叉了,梯度洗脱后峰形不变
rurub
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原文由 easyboy 发表:
含量高了,降低浓度,柱子平衡不好,多做流动相平衡。


浓度不高,平衡方面我试试
tianyu9700
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原文由 rurub 发表:
以前做的标样,峰分离得很好,最近不知道为什么同样的方法,同样的物质,峰却分叉了,原来条件是水,甲醇,乙腈=65:25:10的等度梯度,分析时间为15分钟,现在的条件是以上比例等度洗脱五分钟然后五分钟内变化到10:25:65,再等度五分钟,最后五分钟变化到初始条件,总分析时间是20分钟,出峰时间在7.3分左右,但峰型和保留时间没有任何变化,看了网上的一些资料说柱子也会引起这种问题,特此请教各位老师的一间。

不知道楼主为何要换成梯度洗脱,个人认为,等度能分开的话尽量不要用梯度,梯度的基线没有等度好,还易于出现梯度峰
huaibeijiayuan
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1、尽可能长时间平衡系统和色谱柱。
2、换个保护柱芯试试,以前也碰到类似问题,换了保护柱就ok了
胖子
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123angel
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像是柱子的问题
首先您要是确定标样的纯度没有变化的话就是柱子的问题
如果标样发生变化了,那您之后用的梯度条件也不是很好,所以您的梯度方法做出来也不理想
gongwe
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原文由 rurub 发表:
问题是我原来是等度洗脱,峰分叉了,梯度洗脱后峰形不变


柱子出问题了吧……
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