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液相色谱（LC）

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主题：【讨论】请教液相进样浓度的基本问题

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elfstar

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发表于：2009/03/04 13:07:55 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

做液相也有一年了，细细想来还是有好多不清楚的，都是按照师姐以前说的去做，自己也没想过为什么，比如很简单的一个问题，进液相允许的浓度范围为多少，之前师姐告诉一般控制纵坐标MAU在200以下，浓度过高首先对仪器不好，其次如果是未知样品分离的话，会影响判断，不知道还有没有其他问题，

如果超过200，比如说1000以上，除了对仪器会有损伤以外还会有什么不好吗，或者说也是可以的。

今天师弟做实验，测咖啡因的含量，浓度都在05mg/ml,以下，如果按浓度来说，不算高，可是MAU都到了1400，2000多，这就很高了，不知道这样对结果是不是会有很大影响，不过他测得东西里面就只有咖啡因，应该不会有很大影响吧？

感觉对液相还是很生疏啊，这些问题都不知道，
希望有经验的能不吝赐教！

看了下大家的讨论，浓度过高对柱子和实验结果都会有影响，具体进样浓度和强度还是说的很模糊，能不能举个具体的例子说明下呢。

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2009/3/4 13:35:42 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

没什么影响，只是有的工作站有最大电压值限制，这样的话结果会受影响！

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dickwang2008

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2009/3/4 13:39:06 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 elfstar 发表:
做液相也有一年了，细细想来还是有好多不清楚的，都是按照师姐以前说的去做，自己也没想过为什么，比如很简单的一个问题，进液相允许的浓度范围为多少，之前师姐告诉一般控制纵坐标MAU在200以下，浓度过高首先对仪器不好，其次如果是未知样品分离的话，会影响判断，不知道还有没有其他问题，

如果超过200，比如说1000以上，除了对仪器会有损伤以外还会有什么不好吗，或者说也是可以的。

今天师弟做实验，测咖啡因的含量，浓度都在05mg/ml,以下，如果按浓度来说，不算高，可是MAU都到了1400，2000多，这就很高了，不知道这样对结果是不是会有很大影响，不过他测得东西里面就只有咖啡因，应该不会有很大影响吧？

感觉对液相还是很生疏啊，这些问题都不知道，
希望有经验的能不吝赐教！

对于低浓度可能影响会很大,也就是柱子残留比较多

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elfstar

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2009/3/4 14:04:14 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

对于低浓度可能影响会很大,也就是柱子残留比较多

以前高浓度，我都稀释在进样，看样子以后不用稀释进样了，但不知道如果标准品的浓度为200ug/ml，样品大约为5000ug/ml的时候，稀释和不稀释来讲，那种误差更大。
因为定量分两种，一种是直接样品和标准品的峰面积计算，这个不知道是稀释还是不稀释误差大？
还一种是标准曲线法，标准曲线法应该是要稀释在线性范围呢的吧？

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老多_小多

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2009/3/4 14:44:54 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 elfstar 发表:

对于低浓度可能影响会很大,也就是柱子残留比较多

以前高浓度，我都稀释在进样，看样子以后不用稀释进样了，但不知道如果标准品的浓度为200ug/ml，样品大约为5000ug/ml的时候，稀释和不稀释来讲，那种误差更大。
因为定量分两种，一种是直接样品和标准品的峰面积计算，这个不知道是稀释还是不稀释误差大？
还一种是标准曲线法，标准曲线法应该是要稀释在线性范围呢的吧？

不是绝对的，灵敏度高的样品会超线性，进样品的浓度是根据它的响应来调整的

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