原文由 cl_811224 发表:
用lc-ms/ms同时定量分析两个样品,按照结构相似的原则选择了一个内标,先把给药的样品做了,定了一个大概的范围之后今天开始做标曲,内标采用10ug/mL的浓度平行加入10uL到200uL血清中,结果做出一个奇怪的现象,标曲低浓度的点内标的面积狂小,只有几十到一百多,随着标曲浓度上升,内标的面积也慢慢上去了(不是操作引起的损失),高低浓度之间内标的峰面积差了2个数量级,但是除去内标以外加入的标准物质的量线性非常的好,能做到2个9,开始以为是操作误差,后来又做了两条标曲,都是同样的问题,郁闷了,请有经验的高手指导一下,谢谢了
原文由 cl_811224 发表:原文由 elevern 发表:
单作内标没有样品的生物样本的平行性如何呢?你选择的内标有没有和样品分开还是在一起的,你做一下基质效应和回收率就知道了,多半是内标选择的有问题或者样品对内标的离子化效率产生了影响。
单独加入内标的样品做过了,没有问题,我也怀疑是样品引起内标峰面积变化,但是为什么是低浓度时影响,高浓度时却正常了呢,想不太明白,请指教
原文由 zhufangwei 发表:原文由 cl_811224 发表:原文由 elevern 发表:
单作内标没有样品的生物样本的平行性如何呢?你选择的内标有没有和样品分开还是在一起的,你做一下基质效应和回收率就知道了,多半是内标选择的有问题或者样品对内标的离子化效率产生了影响。
单独加入内标的样品做过了,没有问题,我也怀疑是样品引起内标峰面积变化,但是为什么是低浓度时影响,高浓度时却正常了呢,想不太明白,请指教
不知道你做的是什么试验,本身你的这种做法就是不对的,内标在标准曲线中应该是选择相同的浓度,改浓度的确定是以最大药物的浓度1/2-2/3为原则。单独的说你的内标自己不成线性是有可能的,你的浓度加的太高,会不会有残存效应你自己考察过没有。高浓度正常是因为即使有残存效应对高浓度的影响不明显,可是对于低浓度的影响则比较明显。
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单作内标没有样品的生物样本的平行性如何呢?你选择的内标有没有和样品分开还是在一起的,你做一下基质效应和回收率就知道了,多半是内标选择的有问题或者样品对内标的离子化效率产生了影响。
单独加入内标的样品做过了,没有问题,我也怀疑是样品引起内标峰面积变化,但是为什么是低浓度时影响,高浓度时却正常了呢,想不太明白,请指教
不知道你做的是什么试验,本身你的这种做法就是不对的,内标在标准曲线中应该是选择相同的浓度,改浓度的确定是以最大药物的浓度1/2-2/3为原则。单独的说你的内标自己不成线性是有可能的,你的浓度加的太高,会不会有残存效应你自己考察过没有。高浓度正常是因为即使有残存效应对高浓度的影响不明显,可是对于低浓度的影响则比较明显。
不好意思,你可能没有注意我说的浓度不是内标的高低浓度,应该是标准物质的浓度,内标加的都是一样的,不过在标曲的高低浓度中呈现的峰面积不一致。