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液相色谱（LC）

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主题：【讨论】液相色谱中，在连续两个单进样之间平衡色谱柱重要吗？

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cherry_sun

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发表于：2009/04/23 11:30:25 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最近在学习用UPLC，样品一个一个的做，流动相选择的都不同，我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子（反向柱），然后执行下一个样，流动相往往立刻切换。
昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念，请问这个是什么时候用，作用大吗？我的理解是一个样品测完，改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品，对不？

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2009/4/23 11:37:15 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

重要，特别是走梯度，不平衡保留时候会差很多

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bestalian

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2009/4/23 13:31:10 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 cherry_sun 发表:
最近在学习用UPLC，样品一个一个的做，流动相选择的都不同，我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子（反向柱），然后执行下一个样，流动相往往立刻切换。
昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念，请问这个是什么时候用，作用大吗？我的理解是一个样品测完，改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品，对不？

流动相的切换前，要先用异丙醇冲洗系统，后换上要使用的流动相，而且还要平衡一段时间，就是楼主说的流一段时间的流动相，再进样。否则样品的保留时间变化很大的，

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cherry_sun

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2009/4/23 13:43:12 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 bestalian 发表:
原文由 cherry_sun 发表:
最近在学习用UPLC，样品一个一个的做，流动相选择的都不同，我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子（反向柱），然后执行下一个样，流动相往往立刻切换。
昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念，请问这个是什么时候用，作用大吗？我的理解是一个样品测完，改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品，对不？

流动相的切换前，要先用异丙醇冲洗系统，后换上要使用的流动相，而且还要平衡一段时间，就是楼主说的流一段时间的流动相，再进样。否则样品的保留时间变化很大的，

为什么要用异丙醇冲洗系统呢？那就是要准备一个异丙醇色谱瓶了，机器上有4个管路，分别是A1A2B1B2，我放哪个合适呢？

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cherry_sun

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2009/4/23 13:43:48 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 emoc98311 发表:
重要，特别是走梯度，不平衡保留时候会差很多

哦~~，多谢了。

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123angel

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2009/4/23 14:59:27 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

很重要，当你用的方法不同时，必须要平衡色谱柱，还有用梯度的时候，要保留平衡的时间，不然时间会对不上的，基线也会不好

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bestalian

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2009/4/23 15:16:32 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

异丙醇作为一个可以过度的溶液
是要准备一个放异丙醇的瓶子，是用来冲你要改变的那个通道，所以它没有固定的通道，要更换那个通道的流动相，就冲那个通道

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yuzhulu

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2009/4/23 16:42:37 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 cherry_sun 发表:
最近在学习用UPLC，样品一个一个的做，流动相选择的都不同，我只是在测完一个就用大比例有机相洗一两分钟柱子（反向柱），然后执行下一个样，流动相往往立刻切换。
昨天看资料上有提到平衡色谱柱的概念，请问这个是什么时候用，作用大吗？我的理解是一个样品测完，改为下一个样品的初始流动相比例流一段时间再进下个样品，对不？

你改变初始流动相比例算是走梯度，最好是要平衡一段时间，要不然保留时间会变，基线不稳影响判断。

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