主题:【原创】色谱进阶-谱图的数据处理6:其他峰处理参数

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皮皮鱼
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Width、Slope、Drift之外,还有一些其他辅助峰处理参数。越先进的工作站,这些辅助参数就越多。但实际应用中用的的时候,也越少。这些辅助参数包括:

1、最小峰高、峰面积(min Area;min Height)
很多工作站设置了这两个或其中一个参数。目的在于消除过小的峰的计算量。这些色谱峰很小,因此这些组分(或者基线波动)对结果影响很小,有或者没有这个组分,并不影响分析样品的合格性。
这两个参数的作用方式很简单,就是当色谱峰的峰高小于设定值,或者峰面积积分后小于设定值,就忽略这个色谱峰,不参与计算。

2、灵敏度加倍时间(T。DBL)
根据塔板理论,同一次分析中浓度相同的不同组分,出峰越晚,则峰高越小,峰宽越大。因此晚出峰的组分,Slope设定值应更小,而Width值应该更大。一些工作站和处理机给出这个参数,就是为了解决这个问题。
其作用方式也很简单,就是分析时间每到这个设定值的倍数,就自动把计算实际Slope值减小一倍,Width值增加一倍。例如一个30分钟的分析,这个值设定为10分钟,width设定为8,Slope设定为8。则在工作站实际计算的时候,0-10分钟内,这个Slope和Width计算用值,采用原始设定值8、8。在10-20分钟内,用4、16。在20-30分钟内,用2、32。

3、强制基线。
在分析过程中,可能发生阀切换等情况,导致色谱基线发生波动,易被识别为色谱峰。此时可以在阀切换前设定基线强制,在基线波动结束后解除基线强制。
它的作用方式一样很简单。就是开始基线强制后,工作站不再接受检测器信号的实际值,而是一直把开始强制的值看做当前值进行处理。这样看上去,这一段时间内色谱基线就非常的直,完全没有波动了。

4、强制封闭峰处理。
同样的问题,也可以通过强制封闭峰处理来解决。也就是说基线该波动就波动,看到波动不要紧,但是在这段波动的时间内,不进行峰检出。
也就是说,从开始封闭的时刻到结束封闭的时刻,色谱工作站照常模数转换和绘制色谱谱图,但却不做峰检出,忽略这段时间内的所有峰和波动。

5、停止处理时间。(stop.TM)
在一些时刻,需要在色谱分析结束之前,就开始计算先出峰的某个特殊组分,以满足对数据的特殊紧急需求。这个时候可以设定这个值。工作站在分析时间到这个值的时候就停止接受来自检测器的数据并进行处理,给出分析结果。但这个时候,可能色谱仪仍然在进行后续的程序升温或其他阀操作。
这个参数在现代工作站上基本已经被取消。通用的办法是SnopShot快照功能,可以用快照直接进行处理并报出数据了。
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皮皮鱼
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最后,对这些峰处理参数做一个简单的总结。

Width设定值理论上来说越小越好,过大的设置将导致窄的色谱峰峰面积积分不准确,重现性差的问题;严重下可能导致窄峰无法正常检出。同时,过小的设定存在数据量大,谱图文件占用空间过大;工作站和数据处理机内存占用大;计算量大的问题。这个问题对于现代工作站似乎不是问题,但老的数据处理机内存和计算能力非常有限,过小设置就将出现问题。例如CR-6a处理机,Width小于1,则内存只能存储1小时数据,超过一小时的数据将溢出;分析多组分的汽油等样品,后面的色谱峰数据将无法储存。

Slope理论上设定应该为基线波动的2.5倍。但在目前最小检出限以3倍衡量的情况下,应该更大一些。过小的设定必然造成对基线波动的误识别,出现很多不应该出现的色谱峰;过大的设定则会造成小峰、馒头峰不被识别,或者积分底上斜,造成积分面积偏小,特殊情况下会把不完全分离峰识别为一个色谱峰。
事实上,峰处理无法完全弥补色谱仪的问题。良好的分离和峰型,是良好峰处理的前提。对于峰型良好的色谱峰,Slope设置在大一点或者小一点,完全没有区别;而不好的色谱峰,则略有变化面积就会发生相应变化,很难定量。我曾经在工作站上进行了检验,Slope从2到20000,一个良好的色谱峰峰面积几乎不发生变化,相差小于1%。
峰型越好,峰高越大,Slope的设置区间就越大。在峰型良好的情况下,高一点的Slope值,有利于消除偶然的波动影响。

Drift设置一般都是0,让工作站或数据处理机自行处理。只有特殊情况下需要进行设置,主要在于色谱图有基线漂移、不完全分离峰或者拖尾峰等情况下。通过控制这个值,可以有效的控制峰分离方式,控制峰面积的积分情况。

其他峰处理参数,都是在特殊情况下根据实际需要进行设置。

我曾经对一个不懂色谱的领导说:我想让你的产品合格,就合格,想让你产品不合格,就不合格,所以你最好别惹我。是的,在样品处于合格与否的限制值附近时,通过控制峰处理参数,可以有效的调整分析结果。但这种手法并不建议。做为一个分析人员,给出正确结果是我们的天职,就像医生救人是天职一样。
皮皮鱼
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一个最新发现的slope设置过小的例子。
http://www.instrument.com.cn/bbs/shtml/20090428/1861172/index.shtml
在这个帖子中,明显可以看到由于国产色谱基线稳定性差,Slope设定值过小导致基线被误识别的情况。

当然,除了提高slope值外,也可以采用设置最小峰面积或峰高来解决问题。但这时峰面积积分上可能也存在问题,所以最佳处理仍然是提高slope的设定值。

看他的色谱峰较宽,这是增加width设定值,也是一个解决办法呢。不过强力不推荐。
tgwyh
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除了提高slope值外,也可以采用设置最小峰面积或峰高来解决问题
tgwyh
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yanh0ng
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很好!我希望能学到更好关于数据分析参数设置的知识!谢谢你的指点!
nhwslyt
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