主题：【求助】关于进样口定量环（HPLC）

原文由 fengxuemei 发表:
我们用的也是20ul的定量环，进样是用1ml的一次性注射器，配针头过滤器。每次做样结束，冲柱子时，一般把手柄置于inject状态，这样边冲柱子边清洗进样环路，不知是否可取？进样口是否需要单独再清洗？

原文由 fengxuemei 发表:
我们用的也是20ul的定量环，进样是用1ml的一次性注射器，配针头过滤器。每次做样结束，冲柱子时，一般把手柄置于inject状态，这样边冲柱子边清洗进样环路，不知是否可取？进样口是否需要单独再清洗？

原文由 emoc98311 发表:

原文由 fengxuemei 发表:
我们用的也是20ul的定量环，进样是用1ml的一次性注射器，配针头过滤器。每次做样结束，冲柱子时，一般把手柄置于inject状态，这样边冲柱子边清洗进样环路，不知是否可取？进样口是否需要单独再清洗？

进样是用1ml的一次性注射器?有问题哦
样品体积不是越大越好

原文由 suiyou2011 发表:

原文由 fengxuemei 发表:
我们用的也是20ul的定量环，进样是用1ml的一次性注射器，配针头过滤器。每次做样结束，冲柱子时，一般把手柄置于inject状态，这样边冲柱子边清洗进样环路，不知是否可取？进样口是否需要单独再清洗？

冲柱子的时候还要把进样口打到inject的状态啊？
我们这边赶上进样口冲的哦，开着的话怕会进空气。
不知道你们那边的情况是什么样的

原文由 fengxuemei 发表:

原文由 suiyou2011 发表:

原文由 fengxuemei 发表:
我们用的也是20ul的定量环，进样是用1ml的一次性注射器，配针头过滤器。每次做样结束，冲柱子时，一般把手柄置于inject状态，这样边冲柱子边清洗进样环路，不知是否可取？进样口是否需要单独再清洗？

冲柱子的时候还要把进样口打到inject的状态啊？
我们这边赶上进样口冲的哦，开着的话怕会进空气。
不知道你们那边的情况是什么样的

这样也会进空气啊？那做样时不是一直处于inject状态吗？此时怎么防止空气进入呢？
有点疑惑，能否交流一下你们的具体做法呢？

原文由 suiyou2011 发表:
哦，我们这里冲柱子的时候，将进样口打到load的状态，只有进样的时候才将状态改成inject的。
具体的：将进样针插入进样口后，快速将样注入（注意不要将气泡注入），迅速将进样口达到inject的状态，这样，出峰时间到2分钟左右的时候，可将进洋口变回Load状态，拔出进样针。

冲柱子时 ，直接保持load的状态就可以了哦

原文由 suiyou2011 发表:

原文由 maggiebird 发表:

原文由 suiyou2011 发表:
这么说，之前测定的都不准了
那这样测得的标准曲线就需要重新测定了对吧？
对于为善么要这样测定，我还不是很明白，既然已经有定量环了，为什么还要多进呢？

这是因为流体的流动在定量环的管内形成了层流现象，所以，20uL的定量环当你进样在10uL和40uL之间，实际上你的样品已经部分跑进了废液瓶，就不准了。

所以正确的进样体积是：
  1.半环定量
    进样体积不能大于定量环总体积的一半；
    例如： 20 µL 定量环的最大进样量为10 µL

  2.满环定量
    进样体积至少为定量环总体积的2-5倍；
  例如： 20 µL 定量环的进样量是40-100 µL

谢谢哦，不过，既然满环定量，有部分进入废液，那半环就不存在这个问题么