主题：【求助】关于LC测定甲醛的谱图，怎么判断？最新奇怪的现象！

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发表于：2009/05/06 14:35:15 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

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根据国标测定皮革中的甲醛HPLC法，方法如下：

国标

现在每张图都是一样的，我按第一个峰是甲醛峰，计算回收率是90%，其他三个没有计算，应该也差不多，大家帮我看看吧。

一个非常奇怪的现象，
标准要求衍生后的样品要3个小时内测定，我现在又进了，距离测定样品差不多3个小时了，中间的峰那个有变化，样品里的增大了，回收里面的缩小了，第一个和最后一个没有什么变化，是不是可以说明是第二个峰是我的甲醛峰呢？还有什么方法可以判定哪个是我要的峰。
还有就是标准里要求样品放置在60min~180min之间测定，是不是开始需要衍生60min，但是衍生时间太长也不好，请赐教！

附件：

国标

推荐答案：老多_小多回复于2009/05/06

哈，你用分析纯的做？
我认为是第二个，第一个肯定不是
衍生有个反应过程，标准要求3小时内有道理，过了时间就会慢慢分解，峰开始变化才对

补充答案：

smantha回复于2009/05/06

你也是采用在衍生试剂在254nm测定的吗？如果是这样，应该是后边的才是你要测定的峰吧？前面是衍生试剂的峰，你留意一下，标准溶液越大，前面的峰越小，后边的生成物质的峰越大的。

zhao1025回复于2009/05/06

对你的问题我有些模糊：
1、谱图里不可能有甲醛的峰，应该是甲醛的衍生物

2、是不是甲醛与衍生试剂反应后除出了三个峰，这很不正常啊，我觉得首先要搞懂反应原理，做分析不懂化学式不行的
C6H3(NO2)2NHNH2+HCHO===>C6H3(NO2)2NHN=C-H2

反应后生成的是二四二硝基苯腙苯肼中NH2去掉两个氢与甲醛中碳原子相连碳原子去掉氧也就成了腙类N=C
现象是生成黄色或橙红色沉淀
不知道你观察到这样的现象没有

2、二硝基苯肼应该是有吸收的，所以应该确定衍生试剂的出峰位置

3、甲醛与衍生化试剂反应后应该是两个峰，即使甲醛不纯，第三个峰也会非常小；如果是样品多少峰就不好说了。

4、该反应还有个双键最后，而且甲醛本身液不稳定，所以我认为甲醛衍生物的峰面积会下降随着时间。

有水有渝回复于2009/05/07

直接进一个衍生试剂,先确定它的位置,配制3个浓度差别较大(可成倍数关系)的甲醛进行衍生(加入相同,且保证最高浓度甲醛完全衍生的衍生剂量)后进样,看那个随浓度变化的就是甲醛衍生物了.

aruik202回复于2009/05/08

第一峰应该是二硝基苯肼的峰，第二个峰是二硝基苯腙，你可以进一个只含二硝基苯肼而不含甲醛的的溶液，确定二硝基苯肼的保留时间。