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主题：【讨论】如何配制标准曲线？

浏览0 回复19 电梯直达
dickwang2008
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发表于：2009/05/31 16:07:34 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
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我们在进行生物样品分析时，需要建立生物样品分析的标准曲线。我知道的方法有两种：一种是化合物的储备液用有机溶剂，如甲醇、乙腈来稀释得到工作溶液，然后按照方法将一定量的工作溶液加入到生物基质如血浆中，进行处理后进样分析；另外一种方法是化合物的储备液用合适的溶剂来溶解，然后一直使用生物基质来稀释，然后按照样品处理方法来处理。
从事生物样品分析的站友，你们是如何配制生物标准曲线的？上面两种做法你倾向于哪一种？为什么？

欢迎参与讨论……

注：如出现“学习了、谢谢、顶”等语句，均被认定为水帖，删无赦。
推荐答案：肖筱回复于2009/05/31
我比较倾向先配置纯溶剂的高浓度标线，然后按照一定比例加到介质中去，加进去的有机溶剂比例在2%内！
补充答案：

东风恶回复于2009/05/31

至少5个浓度，以及配制另一个对照进行回收试验。

风之彩回复于2009/05/31

如果说是要接近真正的样品，那么储备液和工作液最好都是水溶的，毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题，很少使用纯水溶解的。
我一般用第一种方式做标准曲线。
原因大概是：1 用第二种，标曲各个点的有机溶剂含量不同，这样基质就不同，用质谱测定，高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的，所以一般也不考虑。

zhufangwei回复于2009/06/01

这两种做标准曲线的方法我都没有用过，如果将标准溶液添加到样品中作前处理，这不就是所谓的工作曲线么，如果使用基质加标做曲线，一个点所加的应该也是一样的，不然就没法衡量和比较了。

diplomatqs回复于2009/06/01

我是用后者，配制一定浓度的化合物的储备液（一般用甲醇定容），然后用生物基质来一步步稀释，配成几个点的标准溶液，然后按照样品处理方法来处理，进样。这样做线性确实不好把握，但每一步都精准处理的话达到两个9还是没问题的（液质联用）。
至于第一中，只能在线性一直不好的时候配一条溶剂溶解的曲线找问题，真正意义不大。

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emoc98311
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2009/5/31 16:12:43 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
从干扰的角度出发是按照样品处理方法来处理，但是这样的线性差点
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dickwang2008
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2009/5/31 16:15:08 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 emoc98311 发表:
从干扰的角度出发是按照样品处理方法来处理，但是这样的线性差点


请楼主说的详细点。你的曲线是如何配制的？
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老多_小多
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2009/5/31 16:22:05 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
为了线性更好，稀释不加基质
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dickwang2008
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2009/5/31 16:24:45 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 emoc98311 发表:
为了线性更好，稀释不加基质


楼主这样做，符合有关的规定吗？这能叫模拟生物样品吗？
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肖筱
ya
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2009/5/31 17:22:58 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我比较倾向先配置纯溶剂的高浓度标线，然后按照一定比例加到介质中去，加进去的有机溶剂比例在2%内！
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老多_小多
emoc98311
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2009/5/31 17:25:54 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 dickwang2008 发表:

楼主这样做，符合有关的规定吗？这能叫模拟生物样品吗？


科学的做法当然是你说的方法，但是现在很多文章也在做假
至少文章中的回收率就有很多都是修改过的
做线性我喜欢第二法，因为它更接近样品，结果也会更准确
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dickwang2008
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2009/5/31 17:30:38 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 emoc98311 发表:
原文由 dickwang2008 发表:

楼主这样做，符合有关的规定吗？这能叫模拟生物样品吗？


科学的做法当然是你说的方法，但是现在很多文章也在做假
至少文章中的回收率就有很多都是修改过的
做线性我喜欢第二法，因为它更接近样品，结果也会更准确


我们不管作假与否，因为这个与我们无关，也不是我们能决定的。我们只是在探讨方法哪种更适合，从试验角度出发。所以也希望后来的参与者能从这个角度出发进行探讨。
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东风恶
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2009/5/31 20:50:15 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
至少5个浓度，以及配制另一个对照进行回收试验。
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风之彩
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2009/5/31 22:17:39 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
如果说是要接近真正的样品，那么储备液和工作液最好都是水溶的，毕竟样品中不会有有机溶剂的嘛。不过一般由于溶解性的问题，很少使用纯水溶解的。
我一般用第一种方式做标准曲线。
原因大概是：1 用第二种，标曲各个点的有机溶剂含量不同，这样基质就不同，用质谱测定，高中低浓度的基质效应可能不同。2 第二种方法其实很浪费空白基质的，所以一般也不考虑。
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zhufangwei
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2009/6/1 12:23:22 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
这两种做标准曲线的方法我都没有用过，如果将标准溶液添加到样品中作前处理，这不就是所谓的工作曲线么，如果使用基质加标做曲线，一个点所加的应该也是一样的，不然就没法衡量和比较了。
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