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主题：【讨论】如何设置梯度起始点

浏览0 回复3 电梯直达
老多_小多
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发表于：2009/06/10 11:09:50 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
设置梯度的程序多种多样，
如果有一个是纯水或缓冲液，如何设置梯度起始点？起始点进纯水或缓冲液有什么利弊？
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2009/6/10 11:59:28 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我觉得这个应该和做样的方法是配套的，我平时做就是找出过度点，然后慢慢切换，一下由水或缓冲盐切换过来总觉得不妥。
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贝壳里的海
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2009/7/7 11:18:29 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 emoc98311 发表:
设置梯度的程序多种多样，
如果有一个是纯水或缓冲液，如何设置梯度起始点？起始点进纯水或缓冲液有什么利弊？

感觉你提问的信息不足。流动相洗脱，即使是梯度洗脱，一般也不会用100%水相的，或多或少会用一点与水相相溶的有机相。要不然时间一长，次数一多，会导致色谱柱填料塌陷，损坏柱子。对于大多数反相柱（如C18）分析而言，摸索一个梯度洗脱条件，开始的梯度，可以用5%左右的有机相，剩余的用水相（纯水或缓冲液），在后续的梯度设置里，逐渐加大有机相比例，最后需要用高比例的有机相走一会以洗掉柱子上可能残留的脏东西，然后再走一会初始梯度以平衡柱子。
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贝壳里的海
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2009/7/7 11:39:24 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
还有你提到的缓冲液，是不是缓冲盐？如果是，那跑完样品，一定要用高比例的水好好的冲洗系统，把残留的盐溶液冲洗干净。
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