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液相色谱（LC）

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主题：【求助】WATERSR C18柱子，刚进样一百多针，就出现峰拖尾，且压力过高。

浏览0 回复13 电梯直达

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发表于：2010/11/01 17:10:56 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我使用的WATERS的UPLC超高效液相色谱仪，在启用一根新的C18柱子后，只进行了食品添加剂的测定，进样一百多针吧，峰形就出现了拖尾，柱效下降，把柱子发回WATERS的应用工程师，检查后说是化学污染，整个柱子的填料都已经污染，正反接，都不行，峰都不好，针对此种情况，大家有什么好的见议没有，帮忙提一下哈。

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2010/11/1 22:29:27 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

用再生方法处理下看是否行

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2010/11/1 22:30:05 Last edit by emoc98311

有水有渝

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2010/11/2 12:21:10 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

使用乙腈-水的梯度长时间冲洗试试，最好楼主能找一下原因，不然以后还可能遇上这类事情就麻烦了。

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天马

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2010/11/2 12:24:30 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

使用异丙醇、乙腈、甲醇和水不同比例冲洗

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2010/11/2 17:12:33 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

首先，感谢各位的好心，我现在是拿不定主意，到底用什么再生方法好呢？
另外，我在实验室的情况，我用不接柱子，只接再线过滤器，测了一下流动相，其中，我所用的纯水和乙酸铵盐走时，压力有较微的升高，纯水是六个小时，升了20个PSI，乙酸铵盐是三个小时升了50个PSI ,目前，我正在试把保护柱再生一下，不知道有没有效果，用的方法是先用100%的甲醇冲洗10个柱体积，再用100%的乙腈冲洗10个柱体积，然后用75%的乙腈25%的异丙醇，再用100%的异丙醇，最后再反回来到原始流动相，不知行不行呀？

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2010/11/2 17:13:11 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

还希望各位高手帮忙指点一二，不胜感谢！！！

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tyrone

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2010/11/3 14:35:58 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 77325(77325) 发表:
我使用的WATERS的UPLC超高效液相色谱仪，在启用一根新的C18柱子后，只进行了食品添加剂的测定，进样一百多针吧，峰形就出现了拖尾，柱效下降，把柱子发回WATERS的应用工程师，检查后说是化学污染，整个柱子的填料都已经污染，正反接，都不行，峰都不好，针对此种情况，大家有什么好的见议没有，帮忙提一下哈。

像这种污染大的样品，最好能加点保护措施。
另外就是选用便宜的柱子，用着不心疼。
别的办法我觉得也只是延缓而已，而且还不一定有效果。
再次使用时很可能检测结果有影响，但是你不一定会发现。

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PGDT

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2010/11/3 16:32:00 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

色谱柱的说明书上通常会有色谱柱的清洗、再生和检测方法。色谱柱资料中会包含一张测试图，按要求测试一下，可以了解色谱柱性能是否恢复。

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有水有渝

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2010/11/3 20:06:08 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 77325(77325) 发表:
首先，感谢各位的好心，我现在是拿不定主意，到底用什么再生方法好呢？
另外，我在实验室的情况，我用不接柱子，只接再线过滤器，测了一下流动相，其中，我所用的纯水和乙酸铵盐走时，压力有较微的升高，纯水是六个小时，升了20个PSI，乙酸铵盐是三个小时升了50个PSI ,目前，我正在试把保护柱再生一下，不知道有没有效果，用的方法是先用100%的甲醇冲洗10个柱体积，再用100%的乙腈冲洗10个柱体积，然后用75%的乙腈25%的异丙醇，再用100%的异丙醇，最后再反回来到原始流动相，不知行不行呀？

还是先找找可能的原因，推测是色谱柱堵塞的话，分析一下是哪一个物质污染了，如果是无机物析出了，你光用有机相冲也不起作用，如果有强保留物质可以用四氢呋喃与氯仿，异丙醇等。

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