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主题：【求助】基线成这样， 是什么原故? 见附图.

浏览0 回复23 电梯直达
ohioohio
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发表于：2010/09/23 03:35:24 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我用梯度(0- 10min, 5% -95% ACN, 10min - 15 min 95% ACN,  UV 242nm)跑空白，基线成这样，  是什么原故? 见附图.
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2010/9/23 7:55:44 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
是否没有平衡好，且你的这个梯度在完成一个梯度后，是如何回复到初始流动相的？
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ohioohio
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2010/9/23 9:11:46 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊


已经平衡了10分钟， 应该不是平衡的问题。检测了柱子，溶剂， 都没有问题， 我怀疑uv检测器出了问题， 但不知如何处理.

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2010/9/23 14:19:39 Last edit by xky0230699
sacid
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2010/9/23 10:21:42 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
你可以用单一浓度（其实就是等度）流动相运行一段时间验证一下是平衡的问题还是uv的问题。
我觉得有水说的对，很可能是没平衡好。
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青林
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2010/9/23 14:18:09 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
平衡了10分钟，有些短了吧？
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有水有渝
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2010/9/23 14:21:55 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ohioohio(ohioohio) 发表:


已经平衡了10分钟， 应该不是平衡的问题。检测了柱子，溶剂， 都没有问题， 我怀疑uv检测器出了问题， 但不知如何处理.


10分钟？一般最少也要平衡30分钟，且走样品之前最好先预运行一下整个梯度，防止色谱柱和管路中有污染物的干扰，楼主的图看不到基线漂移时的保留时间，不知道是不是由于梯度变化引起的？
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wanglin
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2010/9/25 10:04:43 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们一搬也会是三十分钟，有时候会更长，10分钟时间是太短了
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毛毛儿
yangxy12345
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2010/9/25 13:35:38 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
跑梯度一般平衡时间都要长一些，至少半小时吧，如果有缓冲液，时间更久，而且跑完梯度以后还要等系统回到初始比例之后再进行下一次的梯度，不然重现性会很差的！
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〓猪哥哥〓
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2010/9/25 14:57:51 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
10min梯度为5% -95% ACN，梯度变化太快，容易产生波动
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张驰有度
sqxiumeiwang
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2010/9/25 15:16:16 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
柱子的平衡时间应该不低于30分钟吧.
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liuliuhui
liuliuhui
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2010/9/25 22:27:43 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ohioohio(ohioohio) 发表:


已经平衡了10分钟， 应该不是平衡的问题。检测了柱子，溶剂， 都没有问题， 我怀疑uv检测器出了问题， 但不知如何处理.



平衡十分钟的确有点短，一般情况都是30-40min，
另外梯度变化有点快
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