主题:【讨论】液相出峰问题

浏览0 回复12 电梯直达
wangwenhui202
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我需要的物质在六分钟就能够出来,但是检测的时候在十五到二十分钟仍然有较大的峰出现,我该怎样节约检测时间?
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柏坡
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节约检测时间,有点不好办,怎么说也得等后面的峰出来了再进下一针。
wangwenhui202
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那假如到三十多分钟还有峰出现,那不要检测到三十多分钟啊。是不是可以用其他的办法减少检测时间,比如改变流动相或者进样量
阿du
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首先强调,必须等所有峰都出来才可以进行下一次分析。
要快速出完所有峰,只有从柱子和流动相着手。如果走梯度,可在需要的峰出来后迅速增大强溶剂的比例,使后面的组分快速洗脱出来。
或者换短柱子或其他类型柱子,增大流速或提高温度。
但快速出峰也要保证你需要的峰与其它峰之间的良好分离。
阿du
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wangwenhui202
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谢谢了,我还想问一下那如果在我要检测的物质出峰时有一个较大的峰,那应该怎样处理呢?我用的是荧光检测器,检测的是双酚A,激发为225  发射为310,用的是等浓度    乙腈:水=55:44
wangwenhui202
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我使用的条件是按照这篇液相上面来的,这个上面做的,只是没有采用梯度洗脱。
wangwenhui202
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Column
100 x 2.1 mm Hypersil ODS, 5 μm
Mobile Phase
A = Water, B = Acetonitrile
Gradient
at start 40%B, at 15 min 95% B,
Post Time 4 min
Flow Rate 0.4 ml/min
Oven Temp 25 ºC
Injection Vol 1 μl
Diode array detector
230/20 nm Reference 440/80 nm
Fluorescence detector
Ex = 225 nm, Em = 310 nm
这是文献的检索方法,我是采用进样10微升,等浓度洗脱 乙腈:水=55:45
用这样的自己的方法检测标准样品是在六分多钟6.016左右出峰,检测样品时有时会出现较大的峰,或者出现在6.425出峰,我想问一下在6.425出的峰是不是我要检测的物质?出现较大的峰时应该怎样改善?谢谢
柏坡
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如果这个峰很大的话有可能是同种物质,试着降低样品浓度看看有改善吗?
老多_小多
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原文由 wangwenhui202 发表:
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A = Water, B = Acetonitrile
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at start 40%B, at 15 min 95% B,
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Oven Temp 25 ºC
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230/20 nm Reference 440/80 nm
Fluorescence detector
Ex = 225 nm, Em = 310 nm
这是文献的检索方法,我是采用进样10微升,等浓度洗脱 乙腈:水=55:45
用这样的自己的方法检测标准样品是在六分多钟6.016左右出峰,检测样品时有时会出现较大的峰,或者出现在6.425出峰,我想问一下在6.425出的峰是不是我要检测的物质?出现较大的峰时应该怎样改善?谢谢

应该不是,这么快出峰,保留时间不会差这么远,要改善只有降低乙腈比例
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