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液相色谱（LC）

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主题：【求助】出峰时间提前？？

浏览0 回复15 电梯直达

canis

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发表于：2009/07/16 20:05:40 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

最近用HPLC做了一次C肽，用的是C18柱，A泵是0.1%三氟乙酸，B泵是70%的乙腈加0.1%三氟乙酸，发现出峰时间不对，柱子已经平衡了半个小时了已经，换了根新柱子还是这样！

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2009/7/17 0:17:55 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

提前了很多啊，感觉还是流动相的问题，你换个通道试试

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happy王子矜

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ID：wangzijin

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2009/7/17 8:31:57 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

应该是A里面的三氟乙酸有问题。

或者比例阀哪里不对。

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peterfirstone

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2009/7/17 9:25:06 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

估计还是流动相中强溶剂比例过大,可能是你的B泵流量不出问题了,或者你配置问题

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哇咔咔

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ID：feixue810316

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2009/7/17 10:59:25 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

应该是流动相配比问题。要不然不会差这么大。

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知足常乐！

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ID：wenshaowei-2008

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2009/7/17 12:00:11 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

有可能是泵的原因，导致流动相比例错误

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zhanglsyang

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2009/7/17 13:36:41 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

你换过柱子，个人感觉只有以下两点可能：

1、确认两相是否送液正常。

2、三氟乙酸有问题。

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henry1208

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2009/7/17 14:10:53 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

这边也遇到过出峰提前的现象，是柱子引起的可能性很小，所以一般不用试柱子。故障一般在脱气机到泵之间。主要可以解释为流动相比例的改变，流动相中强极性的溶剂进到整个管线的比例增大了，如：乙腈进的多水进的少（乙腈那个通道漏液或水那个通道不能吸液）出峰就提前，首先应该做的是测试哪个通道吸液异常，有堵、漏现象；测试哪通道比例阀部分有漏液现象。如果测试出来了，理论上都是换比例阀，一旦手里又没有新阀备用，为了应急就改用正常的通道，把有问题的通道比例阀入口处管线拆下换上一个死堵头，停止使用！就可以使用了。如果不堵，即便更换通道，漏液的那个通道比例阀部分还继续漏液或进空气（只要它的过滤头在溶剂活空气中），保留时间肯定还不稳定！还有一种可能就是（并不多见）活塞杆密封垫导致出峰提前，密封不好就得更换。

该帖子作者被版主 03yx2加 3积分， 2经验，加分理由：积极回复，加分！

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