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液相色谱（LC）

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主题：【求助】标准曲线浓度配制疑问

浏览0 回复14 电梯直达

gh333666

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发表于：2009/08/04 10:05:31 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

请教各位大虾个问题：在做液相标准曲线时，你们是配制系列浓度，还是同一个浓度进不同的ul做标准曲线啊？请问后面这种方法可靠性好吗？谢谢

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2009/8/4 10:13:09 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 gh333666 发表:
请教各位大虾个问题：在做液相标准曲线时，你们是配制系列浓度，还是同一个浓度进不同的ul做标准曲线啊？请问后面这种方法可靠性好吗？谢谢

6种不同浓度的对照品进样，以峰面积和进样量做标准曲线，可靠不可靠看r就可以了

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水管修理工

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2009/8/4 10:18:28 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我举得还是有区别的有条件的还是配置不同浓度的比较安全可靠。实在没办法的才用不同进样体积（跟单点校正差不多）。可以说一个现象，采不同进样

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雾非雾

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2009/8/4 10:44:57 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

同一个浓度进不同的ul做标准曲线的方法不可靠，因为仪器的响应不和进样量成完全的正比的。

该帖子作者被版主 emoc98311加 2积分， 2经验，加分理由：很有道理

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老多_小多

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2009/8/4 11:25:28 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 mcds 发表:
同一个浓度进不同的ul做标准曲线的方法不可靠，因为仪器的响应不和进样量成完全的正比的。

确实这样，用不同浓度更科学

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有水有渝

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2009/8/4 12:43:20 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 mcds 发表:
同一个浓度进不同的ul做标准曲线的方法不可靠，因为仪器的响应不和进样量成完全的正比的。

如果是精度较好的自动进样器用进不同的体积是可行的，手动的话最好还是配系列浓度，全量进样。前者做曲线的时候按进样量对面积作图就行了。

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jinxiazhu001

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2009/8/6 12:27:19 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

我认为进不同uL的标准溶液结果不太准，因为进样器容易造成误差，还是稀释成不同浓度的溶液好。

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蚊子

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2009/8/6 16:16:42 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

进样器有个定量环，是为了提高进样的重复性的，仪器既然要用到固定的定量环来提高重复性，那么可想而知进不同体积的同一浓度的标准液来做曲线有多不可靠！个人意见，不知道对不对

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jackyale

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2009/9/16 21:57:04 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 mcds 发表:
同一个浓度进不同的ul做标准曲线的方法不可靠，因为仪器的响应不和进样量成完全的正比的。

我不这样认为。我用的是agilent 1100,以我的经验，r值肯定是进不同体积好，特别是在5-20μl之间，4个9肯定没问题。因为在这个范围内正常情况下，自动进样器的定量是非常准的。这样斜率肯定很准，误差主要在标准溶液的配制上，如果标准溶液浓度不准，就会引起截距的变化。但是毕竟你只需要配制一次标准溶液。
而配不同浓度的标准溶液做标曲，需要配置多次标准溶液，容易带来操作误差。可能r值会不如第一种方法好。

当然，还有就是标准溶液配法的影响。我的标品是用减重法直接称在顶上放有漏斗的容量瓶里的，个人感觉只要天平和容量瓶的误差还是比较小的。所以直接配高浓度，进不同体积。
如果要用不同浓度的话，我就要从高浓度的标准品中吸取不同体积到容量瓶中，再以水定容。（低浓度的标准溶液直接称量，天平的精度不够）这一步会带来比较大的操作误差，最终影响标曲的结果。
当然，如果直接称量溶解到容量瓶中，可能误差会小些。

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