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液相色谱（LC）

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主题：【求助】压力不稳定的问题

浏览0 回复11 电梯直达

Randy

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发表于：2009/08/06 19:10:53 楼主管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

今天做样的时候，要用梯度淋洗，用的是甲醇和磷酸盐缓冲液，从甲醇比缓冲液10:90开始，到80:20时候，压力突然就不稳定了，判断是有气泡，然后排气泡。又重新开始，又是到了80:20的时候，压力就开始不稳定，跳动范围很大有30bar的样子，流动相我都做过脱气处理，处理方法是抽滤后超声，加上仪器里的在线脱气，以前做过都ok的，明天我准备重配缓冲液！还是想知道为什么这次这样了？诸位给点建议，

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2009/8/6 21:37:46 沙发管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

梯度洗脱压力波动是普遍现象，看看是否溶剂瓶里的滤头脏了。

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东风恶

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2009/8/6 21:46:13 板凳管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

建议您买一本书籍，慢慢研究就知道了，还有很多东西要自己去摸索的。

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老多_小多

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2009/8/6 22:25:17 马扎管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

梯度变化大，压力变化肯定大

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〓猪哥哥〓

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2009/8/7 8:22:52 地毯管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

跳动，是往上跳，还是往下跳？

80：20，有机相比较较大，防止盐析。

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〓猪哥哥〓

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2009/8/7 8:24:50 地板管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

还有注意看是不是哪个地方是不是有点堵，压力比以前上升了吧？

单向阀注意下，做完用纯水不接柱子冲洗系统。如果纯水效果不佳，可用温水。

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Randy

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2009/8/7 10:08:12 6楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

压力没有上升，重新回来纯甲醇做流动相时，压力没变，就是把缓冲液的比例大到80以后压力就会开始不稳定了

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isee

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2009/8/7 11:28:31 7楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

估计是盐析的结果.

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知足常乐！

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2009/8/7 11:34:47 8楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 bank7233 发表:
压力没有上升，重新回来纯甲醇做流动相时，压力没变，就是把缓冲液的比例大到80以后压力就会开始不稳定了

甲醇的氢键作用
你换成乙腈肯定没有这种现象

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jeanee

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2009/8/7 19:26:57 9楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

学习学习希望早日看到解决方法

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pandora98

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2009/8/8 12:13:19 10楼管理分享倒序浏览只看楼主回复私聊

原文由 bank7233 发表:
今天做样的时候，要用梯度淋洗，用的是甲醇和磷酸盐缓冲液，从甲醇比缓冲液10:90开始，到80:20时候，压力突然就不稳定了，判断是有气泡，然后排气泡。又重新开始，又是到了80:20的时候，压力就开始不稳定，跳动范围很大有30bar的样子，流动相我都做过脱气处理，处理方法是抽滤后超声，加上仪器里的在线脱气，以前做过都ok的，明天我准备重配缓冲液！还是想知道为什么这次这样了？诸位给点建议，

很可能是甲醇比例太大，有盐析出，现在不知道你用的盐的浓度，不过我们一般用10mM。
你可以试着将A和B两个流动相改变一下，A改成10甲醇：90盐，B改成10盐：90甲醇，然后梯度变为A从100％变到10％或者更合适的比例，这样可能会好一点。

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