主题:【求助】请高手解答:如何改变条件使峰分开

浏览0 回复14 电梯直达
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acesben
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首先 非常感谢您的解答
有个疑问  A%:B%  是 甲醇:水?还是  水比甲醇?

这里 是对你的疑问的回复
希望通过我的回复 您能给与我更好的解答
1 本身色素是 有机物还是 无机物 我未知  不知有什么判断方法?
2 它易溶于水和 甲醇  所以 我用硅胶层析时,用的 是 氯仿:甲醇按照全氯仿,10:1,8:1,5:1  这么个 梯度来的  上面的图形 大都是 5:1  浓缩后 用水复溶的
3 我用水溶解 主要是 因为 要再用C18(43~60um)层析 所以 用水溶解
(图一时 我用20%甲醇 层析的图片  没浓缩 所以很低浓度,从中看出 我应该用5%火10%甲醇 先洗 或许效果好些)
4 我做了空白了 可以 基本判断不是 溶剂缝了
5  DAD 惭愧 不是很明白。。
6 之前 我做过 梯度的
是 10%甲醇起
1  10%
2  20%
15  95%
17.5 95%
19  100%
21  100%
出现的图形 为下图2  基本上 集中在中间了
我目的 就是分得一到两种物质 就达到目标了
所以 我选择极性低的 60%甲醇 才出现了 你看到的图片
至于 你后面35min  又变成 25:75 我没用用 下次 采用你的建议 看看

我的色素  在酸性条件下 溶解很好很漂亮颜色
碱性下 浑浊了 我想 应该 用1%甲酸吧?
最后一个问题  1%磷酸 是 磷酸直接配置?还是 用磷酸盐呢? 
我 初次作  液相  有些问题可能问的很没水平  请勿见笑

谢谢 你的帮助





acesben
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接上  你看看 我刚刚发的 图一  4.1min  和 6.1min 这两个 按照 你的解释 是不是 4.1min的 是 甲醇的溶剂峰呢?  因为 我 进样时 没浓缩 含20%甲醇
在一个倒峰  是 水的?
acesben
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有水有渝
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有时流动相只调PH,如加入1%甲酸等,有时加入磷酸二氢钾再调PH,流动相的组成不一样,楼上的梯度我觉得比例变化太大,把甲醇按成乙腈试试,比例变化小一点。
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Last edit by xky0230699
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