主题:【讨论】PH对毛细管电泳的影响?

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chen456
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氨基酸在紫外下没有吸收,一般大家认为应该怎么使其具有吸收呢?衍生剂有哪些适用于毛细管电泳的?
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cpudaxiao
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做过氨基酸的分析。没用衍生试剂,因为后处理会影响分析的结果。印象里还做过丙氨酸的标曲,貌似吸收也没有低到非用衍生剂不可的地步啊!
viernes
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原文由 chen456(chen456) 发表:
氨基酸在紫外下没有吸收,一般大家认为应该怎么使其具有吸收呢?衍生剂有哪些适用于毛细管电泳的?


氨基酸 胺基 羧基 都可以做活性集团 去偶联各种探针分子啊

例如伯胺基上可以标记异硫氰酸根,如FITC等试剂
羧基 可以偶联NHS化得荧光探针
当然这两种都是 荧光探针

如果偶联紫外生色团
也可以借鉴
偶联原理相同
当然还有其他个别的偶联原理 根据偶联分子特异
如配位键偶联的很多 配合物生色团
紫外衍生化反应  范围更宽
根据你要检测的分子  多参考几篇综述文献 才好

二楼的  我想问句
你丙氨酸 你不衍生 检测紫外怎么可能有吸收呢
除非你用的是  电导检测之类的吧
cpudaxiao
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氨基酸在紫外下没有吸收,一般大家认为应该怎么使其具有吸收呢?衍生剂有哪些适用于毛细管电泳的?


氨基酸 胺基 羧基 都可以做活性集团 去偶联各种探针分子啊

例如伯胺基上可以标记异硫氰酸根,如FITC等试剂
羧基 可以偶联NHS化得荧光探针
当然这两种都是 荧光探针

如果偶联紫外生色团
也可以借鉴
偶联原理相同
当然还有其他个别的偶联原理 根据偶联分子特异
如配位键偶联的很多 配合物生色团
紫外衍生化反应  范围更宽
根据你要检测的分子  多参考几篇综述文献 才好

二楼的  我想问句
你丙氨酸 你不衍生 检测紫外怎么可能有吸收呢
除非你用的是  电导检测之类的吧

用的就是PDA啊,确实有吸收,但是能定量的浓度线性范围很窄。

viernes
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chen456
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做过氨基酸的分析。没用衍生试剂,因为后处理会影响分析的结果。印象里还做过丙氨酸的标曲,貌似吸收也没有低到非用衍生剂不可的地步啊!

我试过没有衍生化的样品,在紫外下没有吸收峰,所以就需要衍生,但是衍生后的标品有可能会发生变化。不衍生不行。
chen456
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氨基酸在紫外下没有吸收,一般大家认为应该怎么使其具有吸收呢?衍生剂有哪些适用于毛细管电泳的?


氨基酸 胺基 羧基 都可以做活性集团 去偶联各种探针分子啊

例如伯胺基上可以标记异硫氰酸根,如FITC等试剂
羧基 可以偶联NHS化得荧光探针
当然这两种都是 荧光探针

如果偶联紫外生色团
也可以借鉴
偶联原理相同
当然还有其他个别的偶联原理 根据偶联分子特异
如配位键偶联的很多 配合物生色团
紫外衍生化反应  范围更宽
根据你要检测的分子  多参考几篇综述文献 才好

二楼的  我想问句
你丙氨酸 你不衍生 检测紫外怎么可能有吸收呢
除非你用的是  电导检测之类的吧

话是如此说,但是国内做的很少,文献更少,我对试验更是不懂,现在遇到很多意想不到的问题,我很郁闷,很多国外的文献,大部分都是关于HPLC的,我根本没有依据。
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