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毛细管电泳（CE）
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主题：【求助】怎样增加pCEC的分离度？怎样增加柱效？

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guocc007
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发表于：2009/12/09 10:01:21 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
小弟在做手性药物的拆分，用的大赛璐的CHODR手性柱，甲醇-磷酸盐缓冲液（80：20，pH2.5），流速0.08ml/min。但分离效果不好，最好的一次分离度才1.27；柱效也不高，一般都是1000左右。各位大侠有没有好的办法，增加分离度，增大柱效呢？

这是75:25的，分离度1.14，不加电压。



这是70:30的，分离度1.27，不加电压。



这是80：20的，分离度1.08，加了15KV的电压

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sunpengwjh
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2009/12/9 10:24:33 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主的是两端加压，还是一端加压？
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i_am_ling
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2009/12/9 16:01:46 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主可否把分离的谱图传上来，让打击分析一下！
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guocc007
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2009/12/9 19:28:22 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:
楼主的是两端加压，还是一端加压？

入口加压。就是和普通液相一样的的泵，不断泵入流动相。
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2009/12/9 20:16:08 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
入口加压相当于推动力，楼主试试两端加压呢？
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2009/12/9 20:17:15 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主的额第一个图式不加电压的么？不加电压就是微柱液相色谱！
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2009/12/10 9:46:01 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:
入口加压相当于推动力，楼主试试两端加压呢？

吃了一惊！出口怎么加压啊？！我们仪器是上海通微的，毛细管的出口接在一个小瓶里（电极的另一端也接在这个小瓶里），瓶里面是初始流动相，怎么加压啊？！
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2009/12/10 9:54:20 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
我们用的是安捷伦的可以两端同时加，也可以进样端，也可以出样端的！如果你没有加电压，那就相当于微柱液相色谱，就不是电色谱了！
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2009/12/10 9:55:12 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主怎么确定的pH值？是通过优化条件么？
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2009/12/10 13:13:23 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:
楼主怎么确定的pH值？是通过优化条件么？

看到有文献上用HPLC做的氟伐他汀，也是用CHODR手性柱，用的就是磷酸盐缓冲液pH2.5。在此pH下羧酸基电离很少了吧？但是很奇怪，加上正电压保留时间反而延长，加上负电压保留时间反而缩短，到现在也没搞清楚是什么原因。
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2009/12/10 13:14:54 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 sunpengwjh(sunpengwjh) 发表:
我们用的是安捷伦的可以两端同时加，也可以进样端，也可以出样端的！如果你没有加电压，那就相当于微柱液相色谱，就不是电色谱了！

哦，仪器不同，加压方式也不同吧。反正我们的仪器是没办法两端加压的。
呵呵，不管是CLC还是CEC，只要能分离的好就行啊
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