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主题：【讨论】Tris buffer 能用作酸性缓冲么

浏览0 回复11 电梯直达
viernes
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发表于：2009/12/21 13:27:31 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
请问  Tris base是碱性的，pK在8.0左右，但是师兄曾用Tris-HCl做酸性的电泳缓冲液pH=2.5。
疑惑中，既然是buffer，就要有缓冲能力，偏离pK这么远，岂不是没有缓冲了？
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2009/12/21 13:28:57 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
应该是可以的，好多文献上也是这样使用的，TRIS-HCl，楼主可以测试一下缓冲能力！
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老化验工
zlhuang0132
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2009/12/21 16:38:06 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
Tris的化学式为 (HOCH2)3CNH2，共轭酸碱的定义，它是一元弱碱，只能构成一种缓冲溶液溶液，即Tris+HCl（Tris质子化后成为共轭酸），它的有效缓冲范围应该是pKa±1=8.21±1，控制PH范围偏碱，7.21-9.21，如果调到PH2.5，它完全质子化，几乎没有了共轭碱，也就没有缓冲作用了。这不需要试验，理论计算一下PH2时的缓冲容量就知道了。pKa±1是教科书上明白无误的原则。
如果将Tris加酸至PH1，这时也具有缓冲作用，但此时已经不是Tris的功劳了，因为强酸、强碱也可作缓冲溶液，例如，在PH1.0的硝酸溶液中用EDTA来滴定铋，就是强酸的缓冲作用。
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cpudaxiao
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2009/12/21 18:59:57 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
估计要加很多盐酸了，PH2用醋酸盐好了，但是TRIS的电流确实够小！
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2009/12/21 19:17:33 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 cpudaxiao(cpudaxiao) 发表:
估计要加很多盐酸了，PH2用醋酸盐好了，但是TRIS的电流确实够小！

醋酸也不合适，可选磷酸/磷酸二氢钾（pKa1=2.12）、氨基乙酸-HCl(pKa1=2.35)，选择的原则是所选的弱酸的PKa最接近要求的PH值，这样可保证达到要求的缓冲溶液中共轭酸碱摩尔比最接近1：1，缓冲容量最大（恒C时）。
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老化验工
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2009/12/21 19:25:20 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
楼主提到在PH2.5下的“Tris/HCl”缓冲溶液，我对此作了一个缓冲容量与PH的关系图（总浓度设为0.2mol/L）：


从图上可看出，左边PH<2.0和PH>12.0，都有强烈的缓冲作用，但这时分别是由溶液中的盐酸（PH<2.0）和氢氧根（PH>12.0）在缓冲，并不是tris的。Tris/HCl的缓冲范围是中间的峰形范围（淡绿色区域有缓冲）。
该帖子作者被版主 sunpengwjh加 5积分， 2经验，加分理由：积极帮助版友
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viernes
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2009/12/22 10:19:57 6楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 zlhuang0132(zlhuang0132) 发表:
楼主提到在PH2.5下的“Tris/HCl”缓冲溶液，我对此作了一个缓冲容量与PH的关系图（总浓度设为0.2mol/L）：



人才呀 你的回帖我珍藏了去
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2009/12/22 13:46:18 7楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
zlhuang0132确实回答的很好很充分，也很负责任，这也是值得我们大家学习的！
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spying
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2009/12/23 8:34:02 8楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
谢谢五楼的杰作，学习了！
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yonkoyuki
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2010/11/10 17:32:33 9楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
人才，又热心，值得学习
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sunpengwjh
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2010/11/10 20:06:53 10楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 yonkoyuki(yonkoyuki) 发表:
人才，又热心，值得学习

您是从事区带电泳方向研究好事电色谱方向？
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