主题:【求助】毛细管电泳分析DNA

浏览0 回复14 电梯直达
wy20071722
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
求教:我用毛细管电泳跑DNA,为什么随着时间的增加,DNA的响应却越来越小,重新冲洗毛细管没有用,做药物样品就不会这样。DNA怎么处理才能保证信号变化不会这么快?
该帖子作者被版主 nini20065积分, 2经验,加分理由:发帖鼓励
为您推荐
您可能想找: 毛细管电泳(CE) 询底价
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
CEcret
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
你用的是涂层毛细管么?如果不是,那么存在吸附效应的。。。
该帖子作者被版主 nini20063积分, 2经验,加分理由:应助
nini2006
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
管的问题,样品问题,条件稳定度的问题,要逐一排查
wy20071722
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题,样品问题,条件稳定度的问题,要逐一排查


换过毛细管了,没有改善。样品是新买的。
wy20071722
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 CEcret(v2812644) 发表:

你用的是涂层毛细管么?如果不是,那么存在吸附效应的。。。


我用的是裸管,刚刚溶解的DNA相应很高,放一段时间就不行了。换了新管子也不行。
CEcret
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 CEcret(v2812644) 发表:

你用的是涂层毛细管么?如果不是,那么存在吸附效应的。。。


我用的是裸管,刚刚溶解的DNA相应很高,放一段时间就不行了。换了新管子也不行。


这个正是吸附作用明显的表现。尝试采用:

1. 涂层毛细管

2. 动态涂层技术

3. 极端pH,例如pH>9。
nini2006
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题,样品问题,条件稳定度的问题,要逐一排查


换过毛细管了,没有改善。样品是新买的。
外部条件有变?温度、湿度等……
wy20071722
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题,样品问题,条件稳定度的问题,要逐一排查


换过毛细管了,没有改善。样品是新买的。
外部条件有变?温度、湿度等……


这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。
CEcret
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题,样品问题,条件稳定度的问题,要逐一排查


换过毛细管了,没有改善。样品是新买的。
外部条件有变?温度、湿度等……


这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。


DNA样品,只要保持样品盘控温,稳定性还是可以满足分析要求的。个人认为最重要的因素在于你采用的非涂层裸管的吸附。
wy20071722
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 CEcret(v2812644) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题,样品问题,条件稳定度的问题,要逐一排查


换过毛细管了,没有改善。样品是新买的。
外部条件有变?温度、湿度等……


这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。


DNA样品,只要保持样品盘控温,稳定性还是可以满足分析要求的。个人认为最重要的因素在于你采用的非涂层裸管的吸附。


我特别不明白的是DNA不是带负电吗,管壁也带负电,为什么还有吸附?这不是和极端pH的道理一样吗?

我家仪器没有控温装备
nini2006
结帖率:
100%
关注:0 |粉丝:0
新手级: 新兵
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 CEcret(v2812644) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:
原文由 wy20071722(wy20071722) 发表:
原文由 nini2006(nini2006) 发表:

管的问题,样品问题,条件稳定度的问题,要逐一排查


换过毛细管了,没有改善。样品是新买的。
外部条件有变?温度、湿度等……


这个就不清楚了。我现在认为是DNA本身的原因。做DNA的毛细管电泳可能需要对DNA进行处理保证稳定性。


DNA样品,只要保持样品盘控温,稳定性还是可以满足分析要求的。个人认为最重要的因素在于你采用的非涂层裸管的吸附。


我特别不明白的是DNA不是带负电吗,管壁也带负电,为什么还有吸附?这不是和极端pH的道理一样吗?

我家仪器没有控温装备
咦——你不是用的beckman的仪器吗?实在不行,保持空调常开,门窗紧闭,以控制温湿度。晚上停止实验的时候也不要关。
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
品牌合作伙伴