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主题：【求助】请教：柱子清洗相关问题！！

浏览0 回复5 电梯直达
hec_css
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发表于：2010/01/20 17:57:22 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

请教C18反相蛋白柱子，压力太高，如何进行彻底的清洗？谢谢各位专家的回答！
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2010/1/20 18:10:21 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
需要我也没用过你这样的柱子，帮你顶一下吧
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☜譕♥魚☞
yu358184383
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2010/1/20 19:08:18 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做蛋白的柱子压力都很高的

建议你
F lush with stronger solvents than your mobile phase
用比你的流动相更强的溶剂冲洗
  Reversed-Phase Solvent Choices in Order of
  Increasing Strength    为了增加强度选择反相溶剂
Use at least 25 ml of each solvent for analytical columns
                                  对于分析柱每种溶剂至少用25 ml 冲洗
Mobile phase without buffer salts  没有缓冲盐的流动相
100% Methanol  甲醇
100% Acetonitrile  乙腈
75% Acetonitrile :25% Isopropanol  75乙腈 ： 25％异丙醇
100% Isopropanol  异丙醇
100% Methylene Chloride★  二氯甲烷
100% Hexane ★  已烷
★  When using either Hexane or Methylene Chloride the column must be flushed with
Isopropanol before returning to your resvered-phase mobile phase.
当用已烷蔌二氯甲烷柱子时,必须先用异丙醇冲洗,然后再用你的反相流动相
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有水有渝
xky0230699
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2010/1/20 19:12:35 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
做蛋白的最好要加保护柱
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hec_css
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2010/1/21 11:09:03 地毯 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 ☜譕♥魚☞(yu358184383) 发表:
做蛋白的柱子压力都很高的

建议你
F lush with stronger solvents than your mobile phase
用比你的流动相更强的溶剂冲洗
  Reversed-Phase Solvent Choices in Order of
  Increasing Strength    为了增加强度选择反相溶剂
Use at least 25 ml of each solvent for analytical columns
                                  对于分析柱每种溶剂至少用25 ml 冲洗
Mobile phase without buffer salts  没有缓冲盐的流动相
100% Methanol  甲醇
100% Acetonitrile  乙腈
75% Acetonitrile :25% Isopropanol  75乙腈 ： 25％异丙醇
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100% Methylene Chloride★  二氯甲烷
100% Hexane ★  已烷
★  When using either Hexane or Methylene Chloride the column must be flushed with
Isopropanol before returning to your resvered-phase mobile phase.
当用已烷蔌二氯甲烷柱子时,必须先用异丙醇冲洗,然后再用你的反相流动相


如果我用8mol/L的脲冲洗，再用EDTA冲洗，再用水冲洗，再用乙腈冲洗，您看合理吗？
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2010/1/21 11:35:49 地板 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 xky0230699(xky0230699) 发表:
做蛋白的最好要加保护柱

保护柱很关键啊！冲洗一般很难达到要求啊！
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