主题:【讨论】极限色谱柱中哪一款是适合检测氨基酸的

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极限色谱柱中哪一款是适合检测氨基酸的
该帖子作者被版主 zxhcnf10积分, 2经验,加分理由:欢迎来极限色谱柱版讨论
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huaibeijiayuan
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zxhcnf
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氨基酸分析简介:
组成蛋白质的氨基酸主要有20种,对于这20种常见氨基酸的分析通常用的是氨基酸分析仪和高效液相色谱仪来进行测定。由于氨基酸分析仪需要购买一台专用的仪器,增加了投入,而对于拥有液相的公司来说只需要购买一根色谱柱并采用合适的方法就可以了,因此高效液相色谱法以其低投入、分析速度快、同时分析多种氨基酸的独特优势成为目前氨基酸分析的主要方法。
利用高效液相色谱仪测定氨基酸的分析方法,主要有柱前衍生法和柱后衍生法。
由于氨基酸通常没有紫外吸收或吸收很弱,而且极性很强,在C18柱上几乎没什么保留。因此,在分析前通常需要对氨基酸进行衍生化,使衍生化后的产物既有较强的紫外吸收又有了较强的保留能力,因而得以实现分离和检测,这就是柱前衍生法。同样的柱后衍生法,是先在色谱柱上实现分离,再分离出来的化合物进行衍生,使其便于被检测。
柱前衍生和柱后衍生的原理大致相同,都是氨基酸经过衍生化后进入检测池检测。但柱后衍生具有其固有的缺点:分析柱易被样品组分污染、分析时间长且灵敏度较低、需要专用仪器且仪器较复杂、试剂必须变为中性才能检测等,而柱前衍生则没有这些缺点。因此目前氨基酸分析大多采用柱前衍生法。
zxhcnf
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我们的Ultimate XB-C18色谱柱比较适合用于氨基酸的分析
哇咔咔
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一般都是衍生化 C18柱子,检测,很多厂家的氨基酸专用柱都是C18基质为主的柱子.只不过另外起了个名字
该帖子作者被版主 zxhcnf3积分, 2经验,加分理由:您说得很内行啊,谢谢分享!
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我用的是WATERS UPLC ,它们公司的分析包太贵了,不想买分析包。我想用柱前衍生,前处理方法我基本了解了,但想找一根适合的柱子来做,请极限色普柱的专家给点建议。
zxhcnf
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原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
我用的是WATERS UPLC ,它们公司的分析包太贵了,不想买分析包。我想用柱前衍生,前处理方法我基本了解了,但想找一根适合的柱子来做,请极限色普柱的专家给点建议。

Waters 的UPLC 通常用的色谱柱填料粒径是1.7um的短柱子,由于色谱柱短,所以分析速度快,但压力也很高。
Waters的方法包针对的是一个特定的体系,也就是说是专门针对这款柱子开发的方法,将方法包转移到其它色谱柱上是需要调整的。
事实上很多C18的柱子都可以用于氨基酸的分析,而且也有很多方法可以供选择,比如用异硫氰酸苯酯来做衍生化试剂。您不想购买他们的方法包,可以试用一下我们的Ultimate XB-C18,5um,4.6×250mm的柱子,分析方法如下:



samanthalas
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原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
我用的是WATERS UPLC ,它们公司的分析包太贵了,不想买分析包。我想用柱前衍生,前处理方法我基本了解了,但想找一根适合的柱子来做,请极限色普柱的专家给点建议。

那就用我们的c18柱试试吧,试完还可以写一篇原创。
zxhcnf
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原文由 feixue810316(feixue810316) 发表:
一般都是衍生化 C18柱子,检测,很多厂家的氨基酸专用柱都是C18基质为主的柱子.只不过另外起了个名字

feixue说得很对,很多厂家的氨基酸专用柱都是C18色谱柱改装的,而价格却是改装钱的好几倍,方法包也很贵。我们的XB-C18,5um,4.6*250mm是可以用于氨基酸分析的,因为价格的原因,事实上很多朋友用我们这款柱子替代手头上的专用柱分析氨基酸。
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原文由 zxhcnf(zxhcnf) 发表:
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
我用的是WATERS UPLC ,它们公司的分析包太贵了,不想买分析包。我想用柱前衍生,前处理方法我基本了解了,但想找一根适合的柱子来做,请极限色普柱的专家给点建议。

Waters 的UPLC 通常用的色谱柱填料粒径是1.7um的短柱子,由于色谱柱短,所以分析速度快,但压力也很高。
Waters的方法包针对的是一个特定的体系,也就是说是专门针对这款柱子开发的方法,将方法包转移到其它色谱柱上是需要调整的。
事实上很多C18的柱子都可以用于氨基酸的分析,而且也有很多方法可以供选择,比如用异硫氰酸苯酯来做衍生化试剂。您不想购买他们的方法包,可以试用一下我们的Ultimate XB-C18,5um,4.6×250mm的柱子,分析方法如下:





此款柱子能承受的压力是多大?请专家把此方法及柱子的信息发个邮件给我,行吗?ynfeed@sina.com
快乐
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看到有人提到,检测氨基酸时,可以用“PITC柱前衍生,水性C18柱”,请专家解释一下。
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