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主题：【极限体验】试用月旭后，不得不说。。。

浏览0 回复89 电梯直达
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快乐
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2010/3/8 15:12:08 21楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
回收率每次都能达到95以上吗？
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2010/3/8 16:07:46 22楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
非常详细的资料，学习了，谢谢楼主分享！
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东风恶
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2010/3/8 17:00:02 23楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 快乐(ynsfeed) 发表:
回收率每次都能达到95以上吗？

16种氨基酸回收率均能达到95%以上，这个是最低要求了。
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小卢
luxw
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2010/3/8 19:22:55 24楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
很不错的分析过程，东风真的很厉害啊！
为了公司省了不少钱，这篇文章发表吧！如果发在原创期间一定很厉害！
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闲鹤野云
ruojun
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2010/3/8 19:52:12 25楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
原文由 闲鹤野云(ruojun) 发表:
太好了,真是不错:

精密量取上述对照品和供试品溶液1ml,置试管中,加入A溶液0.5ml,B溶液0.5ml,摇匀,在50±1℃水浴中加热45分钟,取出.加入C溶液1ml,振摇，并用孔径为0.45μm有机膜过滤,放置30分钟后,取澄清的下层液进行分析试验。

既然已经过滤,为何需要放置30分,而且取上清液,难道过滤后还有沉淀物?

上面为油层，下层为水层。我们需要下层做分析。


你们用的标准品脂肪含量很高么,大概是多少,移液枪头下去不会污染么?

如果脂肪低的样品需要水相滤膜过滤么?
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闲鹤野云
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2010/3/8 19:58:15 26楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
5.色谱条件通用性比较。
  UltimateTM （XB-C18, 5um, 4.6×200mm）；waters氨基酸分析柱。结果对比发现分离度均大于1.0，月旭色谱柱在分离度上优于原waters氨基酸分析柱，分析认为月旭色谱柱长于waters氨基酸分析柱。
  理论塔板数均大于3000，而月旭色谱柱均大于5000。分析认为waters氨基酸分析柱为专用氨基酸分析色谱柱，可能更适合其专有的色谱条件。

我不想查书了,麻烦告诉咱们这里的分离度和踏板数如何计算??
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Last edit by ruojun
东风恶
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2010/3/8 21:54:29 27楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 闲鹤野云(ruojun) 发表:
原文由 东风恶(luoleqc) 发表:
原文由 闲鹤野云(ruojun) 发表:
太好了,真是不错:

精密量取上述对照品和供试品溶液1ml,置试管中,加入A溶液0.5ml,B溶液0.5ml,摇匀,在50±1℃水浴中加热45分钟,取出.加入C溶液1ml,振摇，并用孔径为0.45μm有机膜过滤,放置30分钟后,取澄清的下层液进行分析试验。

既然已经过滤,为何需要放置30分,而且取上清液,难道过滤后还有沉淀物?

上面为油层，下层为水层。我们需要下层做分析。


你们用的标准品脂肪含量很高么,大概是多少,移液枪头下去不会污染么?

如果脂肪低的样品需要水相滤膜过滤么?

样品不含有脂肪，就是C组分是溶剂（正己烷）萃取多余的A（衍生试剂）。明白了吗？
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东风恶
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2010/3/8 21:55:33 28楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
原文由 闲鹤野云(ruojun) 发表:
5.色谱条件通用性比较。
  UltimateTM （XB-C18, 5um, 4.6×200mm）；waters氨基酸分析柱。结果对比发现分离度均大于1.0，月旭色谱柱在分离度上优于原waters氨基酸分析柱，分析认为月旭色谱柱长于waters氨基酸分析柱。
  理论塔板数均大于3000，而月旭色谱柱均大于5000。分析认为waters氨基酸分析柱为专用氨基酸分析色谱柱，可能更适合其专有的色谱条件。

我不想查书了,麻烦告诉咱们这里的分离度和踏板数如何计算??

凭您的级别，呵呵。。。您是在考我吗？
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东风恶
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2010/3/8 21:57:21 29楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
分离度　　又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,常用分离度作为柱的总分离效能指标.用R表示.R等于相邻色谱峰保留时间之差与两色谱峰峰宽均值之比.
　　resolution，R
　　相邻两峰的保留时间之差与平均峰宽的比值。也叫分辨率，表示相邻两峰的分离程度。R越大，表明相邻两组分分离越好。一般说当R＜1时，两峰有部分重叠；当R=1.0时，分离度可达98%；当R=1.5时，分离度可达99.7%。通常用R=1.5作为相邻两组分已完全分离的标志。当R＝1时，称为4σ分离，两峰基本分离，裸露峰面积为95.4%，内侧峰基重叠约2%。R＝1.5时，称为6σ分离，裸露峰面积为99.7%。R≥1.5称为完全分离。《中国药典》规定R应大于1.5。
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东风恶
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2010/3/8 21:58:05 30楼 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
理论塔板数　　theoretical plate number，N
　　色谱的柱效参数之一,用于定量表示色谱柱的分离效率（简称柱效）。
　　N取决于固定相的种类、性质（粒度、粒径分布等）、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质。如果峰形对称并符合正态分布，N可近似表示为：
　　N＝()2＝16()2＝5.54()2
　　N为常量时，W随tR成正比例变化。在一张多组分色谱图上，如果各组份含量相当，则后洗脱的峰比前面的峰要逐渐加宽，峰高则逐渐降低。
　　用半峰宽计算理论塔板数比用峰宽计算更为方便和常用，因为半峰宽更容易准确测定，尤其是对稍有拖尾的峰。
　　N与柱长成正比，柱越长，N越大。用N表示柱效时应注明柱长，，如果未注明，则表示柱长为1米时的理论塔板数。（一般HPLC柱的N在1000以上。）
　　若用调整保留时间（tR’）计算理论塔板数，所得值称为有效理论塔板数（N有效或Neff）=16(tR’/W)2
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