实战宝典 原创大赛 仪器问答 仪友会 总帖：8041594今日发帖：292 我的社区 签到
快速导航 采购仪器 提醒
液相色谱（LC）
版主:
入住本版
专家:
居民列表

主题：【求助】人血白蛋白多聚体分析方法求助

浏览0 回复3 电梯直达
frostfish
头像
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
发表于：2010/03/23 15:04:04 楼主 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊

附录Ⅵ Q人血白蛋白多聚体测定法



本法系用分子排阻色谱法测定人血白蛋白多聚体含量。

照分子排阻色谱法（附录Ⅲ D）测定。

色谱条件与系统适用性试验    用亲水硅胶高效体积排阻色谱柱（SEC，排阻极限300kD，粒度10μm），柱直径7.5mm,长60cm；以含1％异丙醇的pH7.0 0.2mol/L磷酸盐缓冲液［取0.5mol/L磷酸二氢钠200ml、0.5mol/L磷酸氢二钠420ml、异丙醇15.5ml及水914.5ml，混匀］为流动相；检测波长为280nm ；流速为每分钟0.6ml。取每1ml含蛋白质为12mg 的人血白蛋白溶液20μl，注入色谱柱，记录色谱图,人血白蛋白单体峰与二聚体峰间的分离度应大于1.5，拖尾因子按人血白蛋白单体峰计算应为0.95～1.40。

测定法    取供试品适量，用流动相稀释成每1ml约含蛋白质12mg的溶液,取20μl，注入色谱柱，记录色谱图60分钟（色谱柱长60cm）。

按面积归一法计算，色谱图中未保留（全排阻）峰的含量(%)除以2，即为人血白蛋白多聚体含量。




计算方法不是很明白，为什么要除以2 ？？？ 全排阻的峰指的是哪一个？？
谢谢
为您推荐
近期热榜
热门活动
您可能想找: 气相色谱仪(GC) 询底价
选参数 看心得 找厂商 查方案
专属顾问快速对接
立即提交
可能感兴趣
有水有渝
xky0230699
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/23 19:51:28 沙发 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
全排阻的峰应该是指除溶剂峰外，最先出来的那个峰，至少为什么这么计算也不明白。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
柏坡
hgycook
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/23 23:47:57 板凳 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
先出来的主峰 分子量大的成分。
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
青橙
chengf3526
结帖率：
100%
关注：0 |粉丝：0
新手级： 新兵
2010/3/24 9:32:43 马扎 管理 分享 倒序浏览 只看楼主 回复 私聊
全排阻峰当然指的是除溶剂峰外保留时间最小的峰
除以2会不会是因为多聚体（二聚体）吸收系数是单体的2倍？猜测
赞贴
0
收藏
0
拍砖
0
举报
手机版： 【求助】人血白蛋白多聚体分析方法求助
猜你喜欢最新推荐热门推荐更多推荐
头像
高级回复 发表评论
品牌合作伙伴
岛津
日立科学仪器
珀金埃尔默仪器（上海）有限公司（PerkinElmer）
日本电子株式会社
丹纳赫
安捷伦
赛默飞世尔科技
普析通用
欧波同
天美
天瑞仪器
德国耶拿
海能技术
马尔文帕纳科
磐诺科技
上海仪电科仪
梅特勒托利多
聚光科技
莱伯泰科
盛瀚
多宁生物
丹东百特
科哲
卓立汉光
屹尧科技
华谱科仪
宝德仪器
优莱博
HORIBA
布鲁克核磁